Orenburg - 2010

1.1 Pöörduv inhibeerimine

1.1.2 Mittekonkureeriv pärssimine

1.1.3 Konkurentsivõimetu pärssimine

1.2 Pöördumatu pärssimine

1.3 Allosteeriline inhibeerimine

2. Uut sorti ensümaatilise aktiivsuse pärssimine

3. Ensüümi inhibiitorite kasutamine

KOKKUVÕTE

Kasutatud kirjanduse loetelu

1. Ensüümi inhibiitorid. Ensüümide aktiivsuse pärssimise tüübid

On teada, et ensüümide aktiivsust saab erinevate mõjutustega suhteliselt lihtsalt vähendada. Sellist ensümaatiliste reaktsioonide kiiruse vähenemist nimetatakse tavaliselt aktiivsuse pärssimiseks või ensüümi inhibeerimiseks.

Joonis 1. Ensüümi toime aktiveerimise ja inhibeerimise skeem (vastavalt Yu. B. Filippovitšile): a. on ensüümi allosteeriline keskus; K - katalüütiline keskus; c - substraadi keskus

Ensüümid on vastavalt valgud, nende aktiivsust saab vähendada või täielikult kõrvaldada valkude denatureerumiseni viivate mõjudega (kuumutamine, kontsentreeritud hapete, leeliste, raskmetallide soolade jne toime). See on ensüümi aktiivsuse mittespetsiifiline pärssimine, mis on oluline ensümaatiliste reaktsioonide uurimisel, ei paku nende mehhanismi uurimisel erilist huvi. Palju olulisem on inhibeerimise uurimine ainete abil, mis spetsiifiliselt ja tavaliselt väikestes kogustes interakteeruvad ensüümidega - ensüümi inhibiitoritega. Paljude bioloogiliste protsesside, nagu glükolüüs, Krebsi tsükkel ja teised, mehhanismide dešifreerimine sai võimalikuks ainult erinevate ensüümide spetsiifiliste inhibiitorite kasutamise tulemusena (N.E. Kucherenko, Yu.D. Babenyuk et al., 1988).

Mõned ensüümi inhibiitorid on tõhusad ravimid loomadele ja inimestele, teised on surmavad mürgid (V.P. Komov, V.N. Shvedova, 2004).

Inhibiitorid interakteeruvad ensüümmolekuli aktiivsete keskustega, inaktiveerides valkude funktsionaalrühmi. Nad võivad suhelda metallidega, mis on osa ensüümi molekulidest ja ensüüm-substraadi kompleksidest, inaktiveerides neid. Inhibiitorite kõrge kontsentratsioon hävitab ensüümi molekuli kvaternaarsed, tertsiaarsed ja sekundaarsed struktuurid, põhjustades selle denaturatsiooni (A.I. Kononsky, 1992).

Hiljuti avastatud antiensüümid (antiensüümid või antiensüümid), mis on valgud, mis toimivad ensüümide inhibiitoritena. Sellised ained hõlmavad näiteks sojaubades leiduvat trüpsiini inhibiitorit ja seerumi antitrüpsiini. Loomade maksast avastati hiljuti antiensüümi ornitiindekarboksülaas. Antisüümid moodustavad tõenäoliselt raskesti dissotsieeruvaid komplekse vastavate ensüümidega, lülitades need välja keemilised reaktsioonid. Mõnikord on inhibiitor ensüümi prekursori lahutamatu osa või osa keerukatest ensüümide kompleksidest. Siiski ei ole veel selgitatud, kas sellised antiensüümid on tõelised inhibiitorid või regulatoorsed subühikud.

Kui inhibiitor põhjustab püsivaid ruumimuutusi tertsiaarne struktuur ensüümi molekule või ensüümi funktsionaalrühmade modifitseerimist, siis nimetatakse seda tüüpi pärssimist pöördumatuks. Sagedamini esineb aga pöörduv inhibeerimine, mida saab kvantitatiivselt uurida Michaelis-Menteni võrrandi alusel. Pöörduv pärssimine jaguneb omakorda konkureerivaks ja mittekonkureerivaks.

Praktikas ei ole paljudel inhibiitoritel omadusi, mis on iseloomulikud puhtalt konkureerivale või mittekonkureerivale inhibeerimisele. Teine viis inhibiitorite klassifitseerimiseks põhineb nende seondumiskoha olemusel. Mõned neist seonduvad ensüümiga substraadiga samas kohas (katalüütilises keskuses), teised aga aktiivsest keskusest märkimisväärsel kaugusel (allosteerilises keskuses) (R. Murray, D. Grenner et al., 1993).

1.1 Pöörduv inhibeerimine

Pöörduvat ensüümi inhibeerimist on kolme tüüpi: konkureeriv, mittekonkureeriv ja mittekonkureeriv, olenevalt sellest, kas ensümaatilise reaktsiooni inhibeerimist on võimalik ületada substraadi kontsentratsiooni suurendamisega või mitte.

1.1.1 Konkurentsi pärssimine

Konkureeriv inhibiitor konkureerib substraadiga aktiivse saidiga seondumise pärast, kuid erinevalt substraadist ei muutu ensüümiga seotud konkureeriv inhibiitor ensümaatiliseks. Iseloomulik omadus konkureeriv inhibeerimine seisneb selles, et seda saab kõrvaldada või nõrgendada, lihtsalt suurendades substraadi kontsentratsiooni. Näiteks kui ensüümi aktiivsus on substraadi ja konkureeriva inhibiitori antud kontsentratsioonidel alla surutud 50%, siis saame inhibeerimise astet vähendada substraadi kontsentratsiooni suurendamisega.

Oma kolmemõõtmelise struktuuri poolest sarnanevad konkureerivad inhibiitorid tavaliselt antud ensüümi substraadiga. Selle sarnasuse tõttu on konkureeriv inhibiitor võimeline ensüümi "petma" ja sellega seonduma. Konkurentsi inhibeerimist saab kvantitatiivselt uurida Michaelis-Menteni teooria põhjal. Konkurentsivõimeline inhibiitor I seostub lihtsalt pöörduvalt ensüümiga E, moodustades sellega kompleksi.

Konkurentsivõimelist inhibeerimist saab kõige hõlpsamini eksperimentaalselt ära tunda, määrates inhibiitori kontsentratsiooni mõju esialgse reaktsioonikiiruse sõltuvusele substraadi kontsentratsioonist. Et selgitada, millist tüüpi - konkureeriv või mittekonkureeriv - ensüümi pöörduv inhibeerimine toimub, kasutatakse topeltpöördumiste meetodit. Topeltpöördkoordinaatides konstrueeritud graafikutelt saab määrata ka ensüümi-inhibiitori kompleksi dissotsiatsioonikonstandi väärtuse (vt joonis 1) (A. Lehninger, 1985)

Konkurentsi inhibeerimist võivad põhjustada ained, mille struktuur sarnaneb substraadi struktuuriga, kuid erineb veidi tegeliku substraadi struktuurist. Selline inhibeerimine põhineb inhibiitori seondumisel substraati siduva (aktiivse) saidiga (vt joonis 2).

Riis. 2. Üldine põhimõte konkureeriv inhibeerimine (skeem V. L. Kretovitši järgi). E - ensüüm; S - substraat; R1 ja R2 - reaktsioonisaadused; I - inhibiitor.

Näiteks on maloonhappe mõju suktsinaatdehüdrogenaasi poolt katalüüsitud reaktsioonile, mis on seotud merevaikhappe muundamisega fumaarhappeks. Maloonhappe lisamine reaktsioonisegule vähendab või peatab täielikult ensümaatilise reaktsiooni, kuna see on suktsinaatdehüdrogenaasi konkureeriv inhibiitor. Maloonhappe sarnasus merevaikhappega on piisav kompleksi moodustamiseks ensüümiga, kuid selle kompleksi lagunemist ei toimu. Merevaikhappe kontsentratsiooni suurenemisega tõrjub see kompleksist välja maloonhappe, mille tulemusena taastub suktsinaatdehüdrogenaasi aktiivsus.

Riis. 3. Merevaikhappe fumaarhappeks muutumise konkureeriv inhibeerimine maloonhappe toimel.

Substraadi (suktsinaadi) ja inhibiitori (malonaat) struktuurid on mõnevõrra erinevad. Seetõttu konkureerivad nad aktiivse saidiga seondumise pärast ja inhibeerimise aste määratakse malonaadi ja suktsinaadi kontsentratsioonide suhte, mitte inhibiitori absoluutse kontsentratsiooni järgi. Seega võib inhibiitor ensüümiga pöörduvalt seonduda, moodustades ensüümi-inhibiitori kompleksi. Seda tüüpi inhibeerimist nimetatakse mõnikord metaboolse antagonismi inhibeerimiseks (vt joonis 3).

Üldiselt võib inhibiitori ja ensüümi interaktsiooni reaktsiooni esitada järgmise võrrandiga:

Saadud kompleks, mida nimetatakse ensüümi-inhibiitori kompleksiks EI, erinevalt ensüümi-substraadi kompleksist ES ei lagune reaktsiooniproduktide moodustumisel.

Paljud ravimained pärsivad inimeste ja loomade ensüüme konkureerides. Näiteks et mõne raviks nakkushaigused põhjustatud bakteritest, kasutatakse sulfaravimeid. Selgus, et neil ravimitel on struktuurne sarnasus para-aminobensoehappega, mida bakterirakk kasutab foolhappe sünteesimiseks, mis on lahutamatu osa bakteriaalsed ensüümid. Selle struktuurilise sarnasuse tõttu blokeerib sulfaniilamiid ensüümi toimet, tõrjudes para-aminobensoehappe kompleksist välja foolhapet sünteesiva ensüümiga, mis põhjustab bakterite kasvu pärssimist.

Bakteriraku seina peptidoglükaani struktuur sisaldab D-alaniini, mis puudub loomadel ja inimestel. Rakuseina sünteesimiseks kasutavad bakterid ensüümi alaniin-ratsemaas, et muuta loomne L-alaniin D-vormiks. Alaniinratsemaas on iseloomulik bakteritele ja seda ei ole leitud imetajatel. Seetõttu on see hea sihtmärk inhibeerimiseks ravimid. Metüülrühma ühe prootoni asendamine fluoriga annab fluoroalaniini, millega seondub alaniin-ratsemaas, mis viib selle inhibeerimiseni.

Ensüümi pärssimine

Ravimid pärsivad sageli ensüümide aktiivsust

Kovalentne (keemiline) modifikatsioon

Proteiinkinaasi A aktiveerimine cAMP poolt

Kovalentne modifikatsioon on teatud rühma pöörduv lisamine või elimineerimine, muutes seeläbi ensüümi aktiivsust. Enamasti on selliseks rühmaks fosforhape, harvemini metüül- ja atsetüülrühmad. Ensüümi fosforüülimine toimub seriini ja türosiini jääkide juures. Fosforhappe lisamine valkudele toimub ensüümide abil. proteiinkinaasid, poolitamine - valgu fosfataas.

Ensüümide aktiivsuse muutus
fosforüülimise-defosforüülimise käigus

Ensüümid võivad olla aktiivsed nii fosforüülitud kui ka defosforüülitud olekus.. Näiteks ensüümid glükogeeni fosforülaas ja glükogeeni süntaas fosforüülitakse, kui keha vajab glükoosi, samal ajal kui glükogeeni fosforülaas muutub aktiivne ja alustab glükogeeni ja glükogeeni süntaasi lagunemist pole aktiivne. Kui on vaja glükogeeni sünteesi, defosforüülitakse mõlemad ensüümid, süntaas muutub aktiivseks ja fosforülaas muutub inaktiivseks.

Metaboolsete ensüümide aktiivsuse sõltuvus
glükogeen fosforhappe olemasolust struktuuris

Meditsiinis arendatakse ja kasutatakse aktiivselt ühendeid, mis muudavad ensüümide aktiivsust, et reguleerida ainevahetusreaktsioonide kiirust ja vähendada teatud ainete sünteesi organismis.

Ensüümi aktiivsuse pärssimist nimetatakse tavaliselt pärssimine aga see ei ole alati õige. Inhibiitor nimetatakse ainet, mis põhjustab ensüümi aktiivsuse spetsiifilist langust. Seega anorgaanilised happed ja raskmetallid ei ole inhibiitorid, vaid on inaktivaatorid, kuna need vähendavad mis tahes ensüümide aktiivsust, st. tegutseda mittespetsiifilised.

Inhibeerimisel on kaks peamist suunda

Vastavalt ensüümi inhibiitoriga seondumise tugevusele võib inhibeerimine olla pööratav ja pöördumatu.

Seoses inhibiitoriga ensüümi aktiivse saidi suhtes jaguneb inhibeerimine järgmisteks osadeks: konkurentsivõimeline ja mittekonkurentsivõimeline.

Pöördumatu inhibeerimisega toimub selle aktiivsuse avaldumiseks vajalike ensüümi funktsionaalrühmade seondumine või hävitamine.

Näiteks aine diisopropüülfluorofosfaat seostub tugevalt ja pöördumatult seriini hüdroksürühmaga ensüümi aktiivses kohas atsetüülkoliinesteraas atsetüülkoliini hüdrolüüsimine närvisünapsides. Selle ensüümi inhibeerimine takistab atsetüülkoliini lagunemist sünaptilises pilus, mille tulemusena jätkab vahendaja toimet oma retseptoritele, mis suurendab kontrollimatult kolinergilist regulatsiooni. Combat töötab samamoodi. orgaanilised fosfaadid(sariin, somaan) ja insektitsiidid(karbofoss, diklorofoss).

Mõned ained põhjustavad pöördumatuid ensüümi inhibeerimine. Vaatame kahte sellist näidet.

Raskmetalliioonide, nagu elavhõbeda (Hg2+), hõbeda (Ag+) ja arseeni (As+) ioonide, samuti teatud joodi sisaldavate ühendite väga madalad kontsentratsioonid on täiesti olemas. inhibeerivad mõningaid ensüüme. Need ained ühinevad pöördumatult sulfhüdrüülrühmadega (-SH) ensüümi molekulis (joonis 4.13) ja sulfhüdrüülrühmad võivad paikneda nii ensüümi aktiivses keskuses kui ka väljaspool seda. Igal juhul on ensüümi struktuur häiritud ja see kaotab katalüüsivõime. Samuti võib esineda ensümaatilise valgu sadestumist.

Teine pöördumatu pärssimise näide- diisopropüülfluorofosfaadi (DFP) toime, mis on närviainete rühma kuuluv ühend. DPP seondub seriini aminohappejäägiga, mis asub atsetüülkoliinesteraasi ensüümi aktiivses kohas. See ensüüm inaktiveerib atsetüülkoliini, mis mängib neurotransmitteri rolli. Atsetüülkoliini üks ülesandeid on tagada närviimpulsi ülekandmine ühelt neuronilt teisele sünaptilise pilu kaudu.

Peaaegu kohe pärast järgmise edastamist impulss atsetüülkoliinesteraas inaktiveerib atsetüülkoliini selle molekule lagundades. Kui a inhibeeritud adetüülkoliinesteraas, siis koguneb atsetüülkoliin, närviimpulsid järgnevad üksteise järel ja lihas ei lõdvene pikka aega. Lõppkokkuvõttes saabub halvatus ja võib juhtuda surm, kuna kannatada saavad ka rindkere lihased, mille tulemuseks on hingamisseiskus. Mõned praegu kasutatavad insektitsiidid (näiteks paratioon) avaldavad putukatele sama mõju. Need võivad kahjustada ka inimese närvi- ja lihassüsteeme.

Allosteerilised ensüümid

Üks levinumaid viise, kuidas ainevahetusradu reguleeritakse, on allosteerilised ensüümid. Allosteeriline nimetatakse ensüümideks, mille toime "määratluse järgi" on seotud kuju muutumisega (alios - erinev, erinev; stereos - vorm).

Selliste ensüümide aktiivsust reguleerivad ained, mis toimivad sarnaselt mittekonkureerivad inhibiitorid. Need ained kinnituvad ensüümide külge spetsiifilistes kohtades, mis on aktiivsest saidist eemal ja muudavad ensüümi aktiivsust, põhjustades pöörduva muutuse aktiivse saidi struktuuris.

Selle tulemusena muutub ka substraadi võime ensüümiga seonduda (kuidas see nähtus erineb mittekonkureeriv pärssimine). Sel viisil toimivaid aineid nimetatakse allosteerilisteks inhibiitoriteks. Joonisel on selgitatud allosteerilise inhibeerimise mehhanismi.

Selle nähtuse näide toimib reaktsioonina, mis toimub glükolüüsi ajal, mis on rakuhingamise üks etappe. Rakuhingamine toimib ATP allikana. Kui ATP kontsentratsioon on kõrge, siis allosteerilise inhibiitorina toimiv ATP pärsib ühe glükolüüsi ensüümi aktiivsust. Kui seevastu rakkude metabolism suureneb ja sellest tulenevalt ATP-d tarbitakse ja selle kogukontsentratsioon langeb, siis pärast inhibiitori eemaldamist hakkab see ainevahetusrada uuesti tööle. See võib olla ka näide lõpptoote inhibeerimisest.

Ensüümide toimet võivad teatud kemikaalid täielikult või osaliselt alla suruda (inhibeerida). - inhibiitorid (joonis 8).

Nende tegevuse olemuse järgi inhibiitorid alajaotatud pöörduv ja pöördumatu. See jaotus põhineb inhibiitor-ensüümi sideme tugevusel.

Pöörduvad inhibiitorid on ühendid, mis mittekovalentselt interakteeruvad ensüümiga ja võivad ensüümist dissotsieeruda.

konkurentsivõimeline. Konkureeriv inhibiitor konkureerib substraadiga seondumise eest aktiivse saidi substraadiga seondumiskohas ja seondub ensüümiga sarnaselt substraadiga. Kuid ensüümiga seotud konkureeriv inhibiitor ei muutu ensümaatiliselt. Konkurentsi pärssimise eripäraks on see, et seda saab nõrgendada või täielikult kõrvaldada, suurendades substraadi kontsentratsiooni. Paljud ravimid on konkureerivad ensüümi inhibiitorid.

Näide. Sulfa ravimid, mida kasutatakse nakkushaiguste raviks. Sulfaniilamiidid on para-aminobensoehappe struktuursed analoogid, millest sünteesitakse mikroorganismi rakus koensüüm (H 4 - folaat), mis osaleb nukleiinsete aluste biosünteesis. Nukleiinhapete sünteesi rikkumine põhjustab mikroorganismide surma.

Pöörduv inhibeerimine võib olla mittekonkurentsivõimeline substraadi suhtes; sel juhul ei konkureeri inhibiitor substraadiga ensüümi sama saidi pärast.

Mittekonkureeriv inhibiitor võib ensüümiga seonduda nii substraadi juuresolekul kui ka puudumisel, substraadi kontsentratsiooni suurenemine ei takista inhibiitori seondumist (joonis 9). Mittekonkureeriv inhibiitor vähendab tegelikult aktiivse ensüümi kogust.

Seondumine viib ensüümi konformatsiooni muutumiseni ja substraadi komplementaarsuse rikkumiseni. Mittekonkureerivad inhibiitorid võivad seonduda pöörduvalt nii vaba ensüümi kui ka ES kompleksiga. Olulisemad mittekonkureerivad inhibiitorid on elusrakus tekkivad vaheproduktid, mis võivad teatud ensüümikohtadega (allosteeriliste keskustega) pöörduvalt seonduda ja muuta nende aktiivsust, mis on üks ainevahetuse reguleerimise viise.

Pöördumatud inhibiitorid - need on ühendid, mis võivad spetsiifiliselt siduda aktiivse tsentri teatud funktsionaalselt olulisi rühmi, moodustades kovalentsed, tugevad sidemed ensüümiga. Samal ajal seostuvad nad pöördumatult, sageli kovalentselt ensüümi või ensüüm-substraadi kompleksiga ja muudavad pöördumatult natiivset konformatsiooni. Mõnede toksiliste ainete toime põhineb ensüümi aktiivsuse pärssimisel, näiteks arseeniühendid, Hg 2+, Pb 2+

Näide Diisopropüülfluorofosfaat inhibeerib ensüüme, mille aktiivses kohas on seriin. Selline ensüüm on atsetüülkoliinesteraas, mis katalüüsib järgmist reaktsiooni:

Reaktsioon toimub iga kord, kui närviimpulss viiakse läbi, enne kui teine ​​​​impulss edastatakse sünapsi kaudu. Diisopropüülfluorofosfaat on üks mürgistest närvimürgitest, kuna see viib neuronite närviimpulsside juhtimise võime kadumiseni.

Näide. Aspiriini kui palaviku- ja põletikuvastase ainena terapeutilist toimet seletatakse sellega, et aspiriin inhibeerib üht ensüümi, mis katalüüsib prostaglandiinide (PG) sünteesi. Prostaglandiinid on ained, mis osalevad põletiku tekkes. Inhibeerimine on tingitud ensüümi ühe aminorühma - prostaglandiini süntetaasi - kovalentsest modifikatsioonist.

Ensüümi pärssimine. Inhibiitor on aine, mis põhjustab spetsiifiline ensüümi aktiivsuse vähenemine. Inhibeerimisel ja inaktiveerimisel tuleks vahet teha. Inaktiveerimine on näiteks valgu denatureerimine denatureerivate ainete toimel.

Ühenduse tugevuse abil Ensüümiga inhibiitorid Inhibiitorid jagunevad pöörduvateks ja pöördumatuteks.

pöördumatud inhibiitorid on tugevalt seotud ja hävitavad ensüümmolekuli funktsionaalsed rühmad, mis on vajalikud selle katalüütilise aktiivsuse avaldumiseks. Kõik valgu puhastamise protseduurid ei mõjuta inhibiitori ja ensüümi seondumist. Näide: fosfororgaaniliste ühendite toime ensüümile - koliinesteraasile. Klorofoss, sariin, somaan ja teised fosfororgaanilised ühendid seonduvad koliinesteraasi aktiivse keskusega. Selle tulemusena fosforüülitakse ensüümi aktiivse tsentri katalüütilised rühmad. Selle tulemusena ei saa inhibiitoriga seotud ensüümi molekulid substraadiga seonduda ja tekib tõsine mürgistus.

Samuti eraldada pöörduvad inhibiitorid, nagu proseriin koliinesteraasi jaoks. Pöörduv inhibeerimine sõltub substraadi ja inhibiitori kontsentratsioonist ning eemaldatakse substraadi liiaga.

Vastavalt toimemehhanismile eraldama:

Konkurentsivõime pärssimine;

mittekonkureeriv pärssimine;

Substraadi inhibeerimine;

Allosteeriline.

1) Konkurentsivõimeline (isosteeriline) pärssimine- see on ensümaatilise reaktsiooni pärssimine, mis on põhjustatud inhibiitori seondumisest ensüümi aktiivse saidiga. Sel juhul on inhibiitor substraadiga sarnane. Selle käigus toimub konkurents aktiivse tsentri pärast: moodustuvad ensüümi-substraadi ja inhibiitori-ensüümi kompleksid. E+S®ES® EP® E+P; E+I® E. Näiteks: suktsinaadi dehüdrogenaasi reaktsioon [joon. COOH-CH 2 -CH 2 -COOH® (noole kohal LDH, FAD®FADH 2 all) COOH-CH=CH-COOH]. Selle reaktsiooni tegelik substraat on suktsinaat (merevaigukollane to-ta). Inhibiitorid: maloonhape (COOH-CH 2 -COOH) ja oksaloatsetaat (COOH-CO-CH 2 -COOH). [riis. 3-auguline ensüüm + substraat + inhibiitor = inhibiitor-ensüümi kompleks]

Näiteks: koliinesteraasi ensüüm katalüüsib atsetüülkoliini muundumist koliiniks: (CH 3) 3 -N-CH 2 -CH 2 -O-CO-CH 3 ® (ChE noole kohal, vee all) CH 3 COOH + (CH 3) 3-N-CH2-CH2-OH. Konkureerivad inhibiitorid on prozeriin, sevin.

2) Mittekonkureeriv pärssimine– inhibeerimine, mis on seotud inhibiitori mõjuga katalüütilisele konversioonile, kuid mitte ensüümi substraadiga seondumisele. Sel juhul võib inhibiitor seonduda nii aktiivse tsentriga (katalüütilise saidiga) kui ka väljaspool seda.

Inhibiitori kinnitumine väljapoole aktiivtsentrit toob kaasa valgu konformatsiooni (tertsiaarstruktuuri) muutumise, mille tulemusena muutub aktiivtsentri konformatsioon. See mõjutab katalüütilist kohta ja häirib substraadi ja aktiivse saidi koostoimet. Sel juhul ei ole inhibiitor substraadiga sarnane ja seda inhibeerimist ei saa eemaldada substraadi liig. Võimalik on kolmekordsete ensüümi-inhibiitori-substraadi komplekside moodustumine. Sellise reaktsiooni kiirus ei ole maksimaalne.

Mittekonkureerivate inhibiitorite hulka kuuluvad:

tsüaniidid. Need seostuvad tsütokroomoksüdaasi raua aatomiga ja selle tulemusena kaotab ensüüm oma aktiivsuse ja kuna. on hingamisahela ensüüm, siis on rakkude hingamine häiritud ja nad surevad.

Raskmetallide ja nende orgaaniliste ühendite (Hg, Pb jt) ioonid. Nende toimemehhanism on seotud nende seosega erinevate SH-rühmadega. [riis. SH-rühmadega ensüüm, elavhõbeda ioon, substraat. Kõik see ühendatakse kolmekordseks kompleksiks]

Mitmed farmakoloogilised ained, mis peaksid mõjutama pahaloomuliste rakkude ensüüme. See hõlmab ka inhibiitoreid, mida kasutatakse põllumajandus, majapidamises kasutatavad mürgised ained.

3) Substraadi pärssimine (konkurentsivõimetu)- substraadi liiast põhjustatud ensümaatilise reaktsiooni pärssimine. Tekib ensüümi-substraadi kompleksi moodustumise tulemusena, mis ei ole võimeline läbima katalüütilist transformatsiooni. Seda saab eemaldada ja substraadi kontsentratsiooni vähendada. [riis. ensüümi sidumine 2 substraadiga korraga]