omch määratlus. Vee mikroobide arvu määramine (laboritöö)

Eesmärk: joogivee ja looduslikest reservuaaridest pärineva vee sanitaar- ja bakterioloogilise seisundi hindamise meetodite uurimine.

Toiduainetööstuse ettevõtetes kasutatav vesi peab vastama kehtivas regulatsioonis joogivee nõuetele. Vee ohutuse epidemioloogilises mõttes määrab mikroorganismide koguarv ja Escherichia coli rühma bakterite arv selle teatud mahus.

Vee kvaliteet tsentraliseeritud süsteemid joogiveevarustus määratakse vastavalt sanitaareeskirjadele ja eeskirjadele. Joogivesi peab olema epidemioloogiliselt ja radiatsiooniliselt ohutu keemiline koostis ja neil on soodsad organoleptilised omadused (tabel 12.1).

Näitajad

* PFU – naastu moodustavad ühikud.

12.1. Proovide võtmine ja analüüsiks ettevalmistamine

Sanitaar- ja bakterioloogiliseks tõrjeks mõeldud vett võetakse 500 cm 3 pudelites, mis on eelnevalt steriliseeritud paberkottides, puuvillase marli korgiga, kaetud pealt paberkorgiga.

Enne proovide võtmist põletatakse kraan või toru serv alkoholiga immutatud süüdatud vatitikuga. Avatakse kraan ja lastakse vett välja 10-15 minutit, seejärel võetakse proov. Vett tuleb analüüsida hiljemalt 2 tundi pärast proovi võtmist.

Veeproovid lahtistest reservuaaridest - kaevudest, basseinidest, jõgedest, järvedest - võetakse batomeetrite abil, mis on massiivse pliipõhjaga metallraam - uppuja. Metallraami sisse sisestatakse pudel. Batomeeter kastetakse etteantud sügavusele ja pudel avatakse korgi külge seotud nöörist tõmmates. Pärast pudeli täitmist pudel eemaldatakse ja suletakse steriilse korgiga.

Klooritud vee proovid võetakse dekloorimisseadmega viaalidesse, kuna vees olevad mikroobid surevad kloori toimel. Dekloorina kasutatakse naatriumsulfaati koguses 10 mg 500 cm 3 katsevee kohta.

Valitud veeproovidele on lisatud saatedokument, mis näitab vastavaid andmeid. Joogiveeproovid tarnitakse külmkonteinerites, mille temperatuur on 4–10 °C.

12.2. Vee kogumikroobide arvu määramine

Mikroobide koguarv (TMC) – see on mesofiilsete aeroobsete ja fakultatiivsete anaeroobsete mikroorganismide arv, mis moodustavad liha-peptoonagaril kolooniaid, kui nakatatakse 1 cm 3 vett, millele järgneb põllukultuuride inkubeerimine temperatuuril 37 ± 0,5 ° C 48 tundi. TMF peaks olema mitte rohkem kui 50 CFU / cm3.

Olenevalt eeldatavast saastumise astmest külvatakse vähemalt kaks erinevat kogust vett, mis valitakse nii, et plaatidel kasvaks 30–300 kolooniat. Kraani- ja arteesiavett külvatakse lahjendamata, igaüks 1 cm 3. Kell bakterioloogiline uuring saastunud veed muudavad põllukultuurid lahjendatud veeks. Lahjendused valmistatakse vastavalt lõigus 8.3 kirjeldatule.

Uuritavast proovist ja katseklaasidest võetakse 1 cm 3 selle lahjendustega vastavalt eeldatavale mikroobse saastatuse astmele, pannakse steriilsetesse Petri tassidesse ja valatakse 10-12 cm liha-peptoonagarisse, mis on sulatatud ja jahutatud temperatuurini 45°C. Käe ringjate liigutustega, pöörates tasse laua horisontaalsel pinnal, jaotage nende sisu ühtlase kihina kogu põhjapinnale. Pärast agari tahkumist asetatakse inokulatsiooniga plaadid 24 tunniks termostaadi temperatuurile 37 °C. Pärast inkubeerimist loendatakse kasvanud kolooniate arv.

Mikroobide arvu määramine selle meetodiga võimaldab tuvastada ainult mesofiilseid aeroobseid ja fakultatiivseid anaeroobseid mikroorganisme.

12.3. Kolibakterite sisalduse määramine vees

Epidemioloogilisest aspektist on eriti oluline avastada vees patogeenseid mikroorganisme - sooleinfektsioonide tekitajaid (tüüfus, düsenteeria, koolera jne.) Kuid kuna bakterioloogilistes analüüsides on patogeensete mikroorganismide tuvastamine väga keeruline, need piirduvad nn sanitaar-indikatiivsete mikroorganismide (SPM) määramisega. Sanitaar-soovituslikud hõlmavad mikroorganisme, mis on pidevalt inimeste või loomade loomulikes õõnsustes. PPM-i esinemine erinevates keskkonnaobjektides näitab nende saastumist inimeste poolt. Mida rohkem SPM-e keskkonnas on, seda tõenäolisemaks muutub konkreetsete patogeenide esinemine. nakkushaigused.

SPM-na on Escherichia coli rühma (EKG) bakterid kõige olulisemad. Kolibakterid kuuluvad Escherichia coli rühma Escherichia, Enterobacter, Citrobacter, Klebsiella, Serratia.

SPM-i koguse määramisel vees kasutatakse järgmisi näitajaid:

. kui-tiiter - väikseim veekogus, milles leidub üks Escherichia coli. Puhastatud joogivee puhul peab Escherichia coli tiiter olema vähemalt 300 cm 3;

. kui-indeks - Escherichia coli arv 1 dm 3 vees. Kui joogivee indeks ei tohiks olla suurem kui 3.

Kolibakterid määratakse vees membraanfiltri meetodil või fermentatsioonimeetodil.

fermentatsiooni meetod. Fermentatsioonimeetodi olemus seisneb teatud koguste uuritava vee külvamises, inkubeerimises

inokulatsioonid temperatuuril 37 °C akumulatsioonisöötmes, millele järgneb nakatamine Endo söötmel, kasvanud kolooniate eristamine ja kõige tõenäolisema CGB-de arvu määramine 1 dm 3 vees.

Tsentraliseeritud veevarustuse vee uurimisel külvatakse katsematerjali kaks korda kolmes mahus: 100, 10 ja 1 cm 3 . Jõe-, järve-, tiigivee uurimiseks valmistatakse kümnekordsed lahjendused 1:10, 1:100, 1:1000 ja külvatakse lahjendamata veel 10 cm 3 ja 1 cm 3. Vesi inokuleerimine toimub kääritusanumates (kolvid, pudelid, ujukitega katseklaasid), mis on täidetud Eikmani glükoosi-peptoonsöötmega. Kultuure inkubeeritakse termostaadis 37 °C juures 24 tundi.

a) gaasi moodustumise ja söötme värvuse muutumise puudumisel annavad nad negatiivse vastuse BGKP olemasolule uuritud veekogus, andes õiguse uuringu lõpetada 24 tunni pärast;

b) happe ja gaasi moodustumisel külvatakse materjal kääritusanumatest Endo söötmele. Isoleeritud kolooniate saamiseks külvatakse paksu tõmbega bakterioloogilise silmusega. Põllukultuuridega tasse inkubeeritakse 24 tundi temperatuuril 37 ° C. Pärast inkubeerimist vaadeldakse põllukultuure. Escherichia colile iseloomulike kolooniate puudumine Endo söötmel annab aluse eitava vastuse andmiseks ja uuringu lõpetamiseks;

c) laktoospositiivsete tumepunaste kolooniate leidmisel Endo söötmel, metallilise läikega või ilma, on vaja kindlaks teha kasvanud mikroorganismide kuuluvus soolebakterite perekonda. Selleks tehakse kolooniate preparaadi mikroskoopia ja oksüdaasi test.

Oksüdaasi test tehti ettepanek eristada Enterobacteriaceae perekonna baktereid perekonna Pseudomonodaceae gramnegatiivsetest bakteritest ja teistest vees elavatest saprofüütidest, mis erinevalt soolebakteritest toodavad ensüümi oksüdaasi.

Oksüdaasitesti seadistamiseks eemaldatakse Endo söötmest silmusena 2-3 igat tüüpi kolooniat. Mikroobne mass kantakse tõmbega spetsiaalse reagendiga niisutatud filterpaberile (2,5 cm 3 etanoolis lahustatakse 30 g α-d-naftooli, lisatakse 7,5 cm 3 destilleeritud vett ja 40 mg dimetüülparafenüleendiamiini). Lahus valmistatakse vahetult enne määramist).

Kui oksüdaasi testi tulemus on negatiivne, ei muuda paber kolooniaga kokkupuutel värvi. Kui paber muutub kolooniaga kokkupuutel 1 minuti jooksul siniseks, loetakse oksüdaasi test positiivseks.

Gramnegatiivsete spoore mittemoodustavate varraste olemasolu, millel puudub oksüdaasi aktiivsus, võimaldab teil kohe anda vastuse CGB olemasolu kohta vees.

Kui Endo söötmel leitakse roosasid ja värvituid kolooniaid, loendatakse need ja igast tüübist 2-3 isoleeritud kolooniat subkultuuritakse Eikmani glükoosi-peptooni söötmesse. Inokulatsioone inkubeeritakse 3-4 tundi temperatuuril 37 ° C. Happe tekkega (söötme värvuse muutumine) ja ujukisse koguneva gaasiga loetakse tulemus positiivseks, happe puudumisel ja gaasi moodustumine - negatiivne.

Pärast analüüsi registreeritakse laboripäevikusse iga inokuleeritud mahu lõplikud tulemused (positiivsed ja negatiivsed) ning määratakse coli-tiiter ja coli-indeks.

Membraanfiltri meetod. Meetodi põhiolemus seisneb bakterite kontsentreerimises teatud kogusest veest membraanfiltritele, millele järgneb nende kultiveerimine Endo söötmel temperatuuril 37 °C, kasvanud kolooniate diferentseerimine ja CGB koguse loendamine 1 cm3 vees. .

Membraanfiltrite ettevalmistamine. Vee filtreerimiseks valitakse membraanfiltrid nr 3, asetatakse temperatuurini 80 ° C kuumutatud destilleeritud vette ja pannakse keetmiseks väikesele tulele. Keetmine toimub kolm korda 10 minutit. Pärast esimest ja teist keetmist tühjendatakse vesi ning pärast kolmandat jäetakse filtrid tarbimiseni vette.

Filtriseadme ettevalmistamine. Filtriseade steriliseeritakse autoklaavis või pühitakse alkoholisse kastetud vatitikuga ja põletatakse steriliseerimise eesmärgil. Filtriseadme lauale asetatakse steriilsete pintsettidega membraanfilter. Filtri kahjustamise vältimiseks asetage selle alla ring steriilset filterpaberit. Filtrilauale koos sellele asetatud filtritega paigaldatakse ja fikseeritakse seadme ülemine osa, lehter (joonis 12.1).

Riis. 12.1. Mikroorganismide arvukuse määramine membraanfiltrite meetodil

Vee filtreerimine ja mikroorganismide kasvatamine. Katsetav veekogus valatakse steriilselt filterseadme lehtrisse ja veejoapumba abil tekitatakse vastuvõtuanumas vaakum. Analüüsides sisenevat joogivett veevarustusvõrk, on vaja võtta maht vähemalt 333 cm 3. Filtreerimise lõpus kantakse membraanfilter flambeeritud pintsettidega Petri tassides oleva Endo toitainekeskkonna pinnale. Praegu toodetakse sobiva toitainekeskkonnaga immutatud filtreid. Kultuure inkubeeritakse termostaadis temperatuuril 37 °C 18-24 tundi.

Analüüsitulemuste töötlemine. Inkubatsiooni lõpus vaadatakse põllukultuure ja tehakse järgmised järeldused:

a) mikroobide kasvu puudumine filtritel või nende kolooniate tuvastamine, mis ei ole CGB-le iseloomulikud, võimaldab teil selles analüüsietapis uuringu lõpule viia, väljastades negatiivse tulemuse CGB olemasolu kohta veres. analüüsitud veekogus;

b) kui filtril leitakse CGB-le iseloomulikke kolooniaid, jätkatakse uuringut. Äigid valmistatakse igat tüüpi mitmest kolooniast, värvitakse Grami järgi ja neid uuritakse mikroskoopiliselt. Väikeste gramnegatiivsete spoore mittekandvate varraste puudumine määrdudes on aluseks analüüsi lõpetamiseks negatiivse tulemuse väljastamisega BGKP esinemise kohta uuritud veekogus;

c) soolestikuga morfoloogiliselt sarnaste gramnegatiivsete pulkade olemasolul määrdudes tehakse oksüdaasi test. Kui membraanfiltritel leitakse sarnaseid laktoospositiivseid kolooniaid (tumepunased, metallilise läikega või ilma), mis ei tooda oksüdaasi, viiakse veeanalüüs selles etapis lõpule ja loendatakse membraanfiltril kasvanud Escherichia coli kolooniate arv. . Tulemust väljendatakse coli indeksina 1 dm 3 vee kohta;

d) kui membraanfiltritel leitakse roosasid ja värvituid kolooniaid, loendatakse nende arv ja 2-3 igat tüüpi isoleeritud kolooniat inokuleeritakse Eikmani glükoosi-peptoonsöötmesse. Pärast 3-4-tunnist inkubeerimist temperatuuril 37 ° C täheldatakse söötme värvuse muutust happe moodustumise ja gaasi kogunemise tõttu ujukis. Sel juhul loetakse tulemus positiivseks. Kui keskkonnas muutusi ei toimu, annavad need BGKP olemasolu kohta negatiivse tulemuse.

Näide coli indeksi määramine: kolm ruumala 100 cm 3 vett filtreeriti. Esimesel ja teisel filtril kasvas kolm kolooniat, kolmandal üheksa kolooniat. Kokku kasvas viisteist kolooniat. Seega on uuritava veeproovi coli indeks: (1000 x 15): 300 = 50. coli indeks muudetakse coli-ks järgmisel viisil: 1000:50 = 20.

testi küsimused

1. Milliseid joogivee epidemioloogilise ohutuse näitajaid teate?

2. Mis on mikroobide üldarv, koliiter ja coli indeks?

3. Millised mikroorganismide perekonnad kuuluvad BGKP-sse?

4. Milliste meetoditega määratakse kolibakterid?

5. Millised on peamised kriteeriumid, mille järgi tehakse kindlaks kolibakterite esinemine joogivees?

6. Mis on oksüdaasi testi eesmärk?

Mikroobide koguarv

Mikroobide üldarv peegeldab bakterite kogutaset vees, mitte ainult neid, mis teatud kultiveerimistingimustes moodustavad toitainekeskkonnas palja silmaga nähtavaid kolooniaid. Need andmed on fekaalse saastumise tuvastamisel väheväärtuslikud ja neid ei tohiks pidada oluliseks näitajaks joogiveesüsteemide ohutuse hindamisel, kuigi kolooniate arvu järsk suurenemine põhjaveeallikast pärineva vee analüüsimisel võib olla varajane signaal põhjaveekihi saastumisest.

Mikroobide üldloendus on kasulik veepuhastusprotsesside, eriti koagulatsiooni, filtreerimise ja desinfitseerimise tõhususe hindamisel, kusjuures peamine ülesanne on hoida nende arvukus vees võimalikult madalal. Mikroobide üldloedust saab kasutada ka jaotusvõrgu puhtuse ja terviklikkuse ning vee tootmiseks sobivuse hindamiseks. toiduained ja joogid, kus mikroobide arv peab olema väike, et minimeerida riknemisohtu. Selle meetodi väärtus seisneb selles, et hälbete tuvastamiseks on võimalik võrrelda tulemusi, kui uuritakse regulaarselt samast veevärgist võetud proove.

Mikroobide üldarv, st bakterikolooniate arv 1 ml joogivees ei tohiks ületada 50.

Veekvaliteedi viroloogilised näitajad

Eriti ohtlikud viirused edasikandumisel vee poolt Nakkushaigused on peamiselt need, mis paljunevad soolestikus ja erituvad suurtes kogustes (kümneid miljardeid 1 g rooja kohta) koos nakatunud inimeste väljaheitega. Kuigi viirused väljaspool keha ei paljune, on enteroviirustel võime väliskeskkonnas ellu jääda mitu päeva ja kuud. Eriti palju enteroviirusi reovees. Veepuhastusrajatiste veevõtu ajal leitakse veest kuni 43 viirusosakest 1 liitri kohta.

Viiruste kõrge ellujäämismäär vees ja inimeste ebaoluline nakkav doos põhjustavad viirusliku hepatiidi ja gastroenteriidi epideemilisi puhanguid, kuid läbi veeallikate, mitte joogivee. See võimalus jääb siiski potentsiaalseks.

Vees leiduvate viiruste lubatud sisalduse kvantifitseerimise küsimus on väga keeruline. Viiruste määramine vees, eriti joogivees, on samuti keeruline, kuna proovide võtmise ajal on vee juhusliku saastumise oht. AT Venemaa Föderatsioon SanPiN-i järgi viiakse viirusliku saastumise hindamine (kolifaagide sisalduse määramine) läbi kolifaagi poolt tekitatud naastude moodustavate üksuste arvu loendamisega. Otsene määratlus viirused on väga rasked. Kolifaagid esinevad koos sooleviirustega. Faagide arv on tavaliselt suurem kui viirusosakeste arv. Kolifaagid ja viirused on suuruselt väga lähedased, mis on filtreerimisprotsessi jaoks oluline. SanPiN järgi ei tohiks 100 ml proovis olla naastu moodustavaid ühikuid.

Algloomad

Kõigist teadaolevatest vee kaudu levivatest inimestele patogeensetest algloomadest võivad olla amööbiaasi (ameobne düsenteeria), giardiaasi ja balantidiaasi (ripsloomad) tekitajad. Joogivee kaudu tekivad need infektsioonid aga harva, ainult siis, kui kanalisatsioon sinna satub. Kõige ohtlikum inimene on lamblia tsüstide reservuaari allikas-kandja. Sattudes kanalisatsiooni ja joogivette ning seejärel tagasi inimkehasse, võivad need põhjustada giardiaasi, mis tekib kroonilise kõhulahtisusega. Võimalik surmav tulemus.

Aktsepteeritud standardi kohaselt ei tohiks Giardia tsüste 50-liitrises joogivees täheldada.

Joogivees peaks puuduma helmintid, samuti nende munad ja vastsed.

Seoses loodusliku päritoluga allikatest pärit veega eristatakse mikroorganisme - saprobionte ja katarobionte, mida peetakse veekogude mikrobioloogilise reostuse indikaatoriks. Kataroobiontide rühma(Katarobs) hõlmab mikroorganisme, mis elavad ainult puhtas allikavees. Saprobionti rühm(saproobid) moodustab kõigi teiste mageveekogude mikrofloora.

Saproobiks nimetatakseteatud füsioloogilised omadused teatud tüüpi mikroorganismid, mis määravad nende eluvõime orgaaniliste ühenditega saastunud veekeskkonnas. Veekogude saproobiusindeksite arvutamisel lähtutakse nende mikrofloora kompleksi moodustavate organismide liigilisest saproobilisusest.

Alljärgnev tabel näitab looduslike veekogude puhtusklassi ja reostustaseme sõltuvust nende vee mikrobioloogilistest näitajatest.

Tabel 1

Mikrobioloogilise saastumise näitajad on rakendatavad paljudes tööstusharudes. Veehoidlate puhtuse nõudeid reguleerivad GOST, TU (tehnilised tingimused), muu regulatiivne dokumentatsioon ja neil on erinevate objektide suhtes olulisi erinevusi. Näiteks ujula käitamine on võimatu ilma tootmiskontrolli programmita. See tuleb kooskõlastada selle haldusterritoriaalse üksuse riikliku sanitaar- ja epidemioloogilise järelevalve peaarstiga ja saada luba selle ujumisrajatise haldava organisatsiooni juhtkonnalt.

tabel 2


Tabel 3

Lugupeetud härrased, kui teil on vajadus parandada loodusliku või tööstusliku vee mikrobioloogilise saastatuse näitajaid, pöörduge ettevõtte spetsialistide poole. Vesimees. Töötame välja optimaalse vee desinfitseerimise skeemi.

Vee ja kemikaalide mittevastavus muudab selle joogikõlbmatuks. Kui teie veeallikas ei ole kaitstud otsese keskkonnamõju eest või tehnosüsteemid on vananenud või neid pole pikka aega puhastatud, on mikrobioloogiline testimine kohustuslik. Teie tervis ja ohutus sõltub sellest! See on eriti oluline neile, kes kaevu kasutavad. - pinnas, see puutub pinnasega otse kokku, mis tähendab, et see ähvardab teid "juua" nitraate, raskmetalle, ammoniaaki ja loomulikult kahjulikke orgaanilisi aineid, mis satuvad mulda põllumajanduslike talude või maade tegevuse tulemusena.

Tabelis 1 on toodud joogivee kehtiva standardi SanPiN 2.1.4.1074-01 mikrobioloogilised näitajad:

Tabel 1. Joogivee mikrobioloogilised standardid

Standardne mikrobioloogiline analüüs

Moskva Riikliku Ülikooli joogivee standardne mikrobioloogiline analüüs sisaldab kolme näitaja määramist: mikroobide üldarv, kolibakterite koguarv ja termotolerantsete kolibakterite arv.

Täiustatud mikrobioloogiline analüüs

Vee laiendatud mikrobioloogiline analüüs hõlmab viie näitaja analüüsi: mikroobide üldarv, kolibakterite üldarv, termotolerantsete kolibakterite arv, kolifaagide tiiter ja sulfiteid redutseerivate bakterite eoste sisaldus.

Pinnaveekogude (tiigid, jõed, basseinid) mikrobioloogiline analüüs

Sageli on meie objektidel või läheduses veekogusid, kus meile ja meie lastele meeldib mõnuga aega veeta. Loomulikult ei ole nendes reservuaarides olev vesi joogikõlblik, kuid selle ohutus inimestele ja ka joomine on reguleeritud. Tabelis 2 on toodud kehtiva pinnaveekaitse hügieeninõuete standardi (SanPiN 2.1.5.980-00) mikrobioloogilised näitajad.

Tabel 2. Mikrobioloogilised normid meelelahutuslikul veekasutusel, samuti asustatud alade piires

Standardne mikrobioloogiline analüüs (pinnavesi)

Joogiks mitte ettenähtud vee mikrobioloogiline analüüs hõlmab kahe indikaatori arvu määramist: kogu kolibakteri ja kolibakteri termotolerantsed bakterid.

Täiustatud mikrobioloogiline analüüs (pinnaveed):

Lisaks kahele põhinäitajale teeme ettepaneku läbi viia täiendav analüüs kolifaagide, oportunistlike pärmseente ja mikromütseetide (oportunistlike haiguste sagedased satelliidid) sisalduse ning veehoidla enesepuhastusindeksi kohta.

Perekondade Salmonella ja Enterococcus bakterite määramine

SanPiN 2.1.5.980-00 standardite märkimisväärse ületamise ja reservuaari võimaliku väljaheitega saastumise korral teeme ettepaneku analüüsida sooleinfektsioonide patogeenide (perekond Salmonella ja Enterococcus) olemasolu.

Sõnastik

Mikroobide koguarvukus (TMC)

Meetod määrab joogivees koguarv mesofiilsed aeroobsed ja fakultatiivsed anaeroobsed mikroorganismid (FMC), mis on võimelised moodustama toitaineagaril temperatuuril 37 °C 24 tunni jooksul kolooniaid, mis on nähtavad 2-kordse suurendusega. See indikaator tuvastab potentsiaalsed bakterid, mis võivad inimeste tervist kahjustada.

Tavalised kolibakterid (TCB)

Tavalised kolibakterid (CBC) on gramnegatiivsed, oksüdaasnegatiivsed, eoseid mittemoodustavad vardad, mis võivad kasvada diferentsiaalsel laktoosisöötmel, fermenteerida laktoosi happeks, aldehüüdiks ja gaasiks temperatuuril (37 + 1) °C. 24-48) tundi. Paljud selle rühma esindajad on mao normaalse mikrofloora mikroorganismid, mistõttu selle mikroorganismide rühma liig võib viidata võimalikule inimtekkelise (sh fekaalse) veereostusele.

Termotolerantsed kolibakterid (TCB)

Termotolerantsed kolibakterid (TCB) kuuluvad tavaliste kolibakterite hulka, neil on kõik oma omadused ja lisaks on nad võimelised kääritama laktoosi happeks, aldehüüdiks ja gaasiks temperatuuril (44 ± 0,5) ° C 24 tunni jooksul. Nagu OKB, on nad indikaatorrühm, kuid on stabiilsemad keskkond: seetõttu võib selle mikroorganismide rühma tuvastamine vees viidata selle ühemõttelisele saastumisele inimjäätmetega.

kolifaagid

Standardmeetodil (MUK 4.2.1018-01) määratud kolifaagid on E. coli viirused (Escherichia coli) ja epidemioloogid peavad neid täiendavaks ja mõnikord tundlikumaks meetodiks E. coli mikroorganismide poolt põhjustatud veereostuse määramisel. coli rühm. Viiruseosakesed ja eriti kolifaagid on keskkonna suhtes vastupidavamad kui nende peremeesbakterid. Sellega seoses võib kolifaagide olemasolu olla usaldusväärne marker veeallika vanema fekaalsaaste kohta. Näidati otsest seost vees leiduvate kolifaagide sisalduse ja inimesele ohtlike enteroviiruste vahel, seega võib kolifaagide esinemine vees viidata allika viirusinfektsioonile. praegune normdokument(SanPiN 2.1.4.1074-01) tähendab kolifaagide puudumist 100 ml vees.

Sulfiiti redutseerivate klostriidide eosed

Sulfiite redutseerivad klostriidid on eoseid moodustavad anaeroobsed pulgakujulised mikroorganismid, mis on reservuaari fekaalreostuse mikrobioloogiline lisaindikaator. Erinevalt suhteliselt ebastabiilsetest kolibakteritest ja termotolerantsetest kolibakteritest võivad Clostridiumi eosed veekogudes püsida pikka aega. Klostridia leidub inimeste ja koduloomade soolestikus, kuid veega allaneelamisel suurel hulgal võib põhjustada toidumürgitust. Sulfiite redutseerivate klostriidide hulka kuuluvad inimesele ohtlikud klostriidid (Clostridium botulinum, Clostridium perfringens, Clostridium tetani), mis põhjustavad raskeid haigusi. Kehtiva standardi (SanPiN 2.1.4.1074-01) kohaselt ei tohiks Clostridia eosed 20 ml vees olla.

Oportunistlikud pärmid ja mikromütseedid

Tinglikult patogeensed pärmid ja mikromütseedid (hallitusseened) hõlmavad suurt heterogeenset rühma seenorganisme, mis võivad 37 °C juures saprotroofselt kasvada. See hõlmab selliseid esindajaid nagu Candida albicans ja Cryptococcus neoformans, mis on ühine tegur inimese oportunistlikud haigused, mis põhjustavad kandidoosi ( seenhaigused nahk), soor jne. Muud mikromütseedid (Cladosporium cladosporioides, Aspergillusniger) võivad olla aktiivsed sensibilisaatorid allergilised reaktsioonid ja mõnikord ka allergeenid ise. Vene Föderatsioonis ei ole vesi hallitusseente ja pärmseente jaoks vees standardiseeritud.

Isepuhastusindeksi määramine (MUK 4.2.1884-04)

Puhkealade reservuaaride vees ei ole mikroorganismide koguarv standarditud, kuna selle mikroorganismide rühma tase sõltub suuresti iga objekti looduslikest omadustest, aastaajast jne.

Uue veevarustuse allika või reservuaaride vees puhkekoha valikul tuleb aga lisaks määrata mikroobide kogupopulatsioon, mis kasvab:

  • temperatuuril 37 ° C 24 tundi;
  • 22°C juures 72 tundi.

Eeldatakse, et:

  1. TMP 37 °C juures on enamasti esindatud alohttoonse mikroflooraga (sisse viidud reservuaari inimtekkelise reostuse, sh fekaalreostuse tagajärjel);
  2. TMP temperatuuril 20-22 °C on esindatud lisaks alohtoonilisele aborigeenilisele mikrofloorale (looduslik, iseloomulik sellele reservuaarile).

Nende mikroorganismide rühmade arvukuse suhe võimaldab hinnata isepuhastusprotsessi intensiivsust. Isepuhastusprotsessi lõpus on OMC koefitsient 22 ° C / OMC 37 ° C. Majapidamisreovee reostuskohtades on mõlema rühma arvväärtused lähedased.

Indikaator annab lisateavet veekogude sanitaarseisundi, saasteallikate ja isepuhastusprotsesside kohta.

Kraanivett inokuleeritakse mahus 1 cm3 (1 ml). Proov asetatakse steriilsesse Petri tassi, valatakse 10-12 ml sulatatud ainesse ja jahutatakse temperatuurini 45 °C toitaineagariga, segatakse veega. Inokulatsiooni inkubeeritakse 37°C juures 1-2 päeva. Seejärel loendatakse ja arvutatakse söötme pinnal ja sügavuses kasvanud kolooniate arv vee mikroobide arv- mikroorganismide arv 1 ml-s.

Tiitrimismeetod
Kraanivee uurimiseks valmistatakse saaki kolmes mahus 100 ml, kolmes mahus 10 ml ja kolmes mahus 1 ml glükoospeptoonsöötmes. Põllukultuure inkubeeritakse üks päev temperatuuril 37 °C. Käärimist hinnatakse gaasimullide olemasolu järgi ujukis. Käärinud või häguseid proove kasvatatakse Endo söötmel.
Kasvanud kolooniatest tehakse määrded, värvitakse grammi järgi ja tehakse oksüdaasi test, mis võimaldab eristada perekondadesse kuuluvaid baktereid. Escherichia, Citrobacter ja Enterobakter perekonna gramnegatiivsetest bakteritest Pseudomonadaceae ja teised vees elavad oksüdaasipositiivsed bakterid.
Coli-tiiter vett mõõdetakse minimaalse veekoguse (ml) järgi, milles CGB-sid leidub, kui-indeks - BGKP kogus 1 liitris katsevees.

Õhu mikroobide arvu määramine

Kvantitatiivsed mikrobioloogilised meetodid õhu uurimisel põhinevad sedimentatsiooni (settimine), aspiratsiooni või filtreerimise põhimõtetel.
settimise meetod. Kaks Petri tassi toitaineagariga jäetakse 60 minutiks avatuks, seejärel inkubeeritakse põllukultuure termostaadis 37 °C juures. Tulemusi hinnatakse mõlemal plaadil kasvanud kolooniate koguarvu järgi: kui kolooniaid on vähem kui 250, loetakse õhk puhtaks; 250-500 kolooniat – mõõdukalt saastunud, üle 500 kolooniaga – saastunud.
Aspiratsiooni meetod- täpsem kvantitatiivne meetod õhu mikroobide arvu määramiseks. Õhkkülv toimub seadmete abil (Krotovi seade ja proovivõttur PAB-1).
Krotovi aparaat on konstrueeritud nii, et õhk imbub etteantud kiirusega läbi Petri tassi toitaineagariga katva pleksiklaasplaadi kitsa pilu. Sel juhul kinnituvad aerosooliosakesed koos nendes sisalduvate mikroorganismidega ühtlaselt kogu söötme pinnale tänu topsi pidevale pöörlemisele sisselaskeava all.
Pärast külvi inkubeerimist termostaadis arvutatakse mikroobide arv

Steriliseerimise meetodid

  • Termiline: aur ja õhk (kuiv kuumus)
  • Kemikaal: gaas või keemilised lahused (sterilandid)
  • Plasma (vesinikperoksiidi plasma)
  • Kiirgussteriliseerimine - kasutatakse tööstuslikus versioonis
  • Membraanfiltri meetod - kasutatakse väikese koguse steriilsete lahuste saamiseks, mille kvaliteet võib muude steriliseerimismeetodite (bakteriofaag, selektiivne toitainekeskkond, antibiootikumid) toimel järsult halveneda.

Termilise steriliseerimise meetodid

Termilise steriliseerimise meetodite eelised:

  • Töökindlus
  • Sterilante pole vaja meditsiinitarvetest eemaldada
  • Personali kasutusmugavus
  • Steriliseerimine toimub pakendites, mis võimaldab säilitada steriilsust teatud aja jooksul.

Auruga steriliseerimine

See viiakse läbi küllastunud auru juhtimisel rõhu all aurusteriliaatorites (autoklaavides).

Auruga steriliseerimist rõhu all peetakse kõige tõhusamaks meetodiks, kuna mida kõrgem on rõhk, seda kõrgem on materjali steriliseeriva auru temperatuur; Auru bakteritsiidsed omadused on kõrgemad kui õhul, seetõttu kasutatakse steriliseerimiseks üleküllastunud auru.

Auruga steriliseeritakse tekstiiltooteid (aluspesu, vatt, sidemed, õmblusmaterjalid), kummi, klaasi, mõningaid polümeermaterjale, toitaineid ja ravimeid.


Seotud Informatsioon:

  1. Tehnoloogiliste muutujate vaheliste seoste analüüs, protsesside läbiviimise põhinõuete määramine, kvaliteedikriteeriumide ja juhtimiseesmärkide sõnastamine
  2. Tulekahjude arvu dünaamika analüüs aastatel 2010-2014 ja tulekahjude arvu prognoos 2015. aastaks
  3. Tulekahjude arvu analüüs 3 ROND poolt teenindatavas piirkonnas ajavahemikul 2010-2014
  4. Stenokardia: 1) määratlus, etioloogia ja patogenees 2) klassifikatsioon 3) patoloogiline anatoomia ja erinevate vormide diferentsiaaldiagnostika 4) lokaalsed tüsistused 5) üldised tüsistused