omc definīcija. Ūdens mikrobu skaita noteikšana (laboratorijas darbs)

Darba mērķis: dzeramā ūdens un dabisko ūdenskrātuvju ūdens sanitārā un bakterioloģiskā stāvokļa novērtēšanas metožu izpēte.

Pārtikas rūpniecības uzņēmumos izmantotajam ūdenim jāatbilst spēkā esošajos normatīvajos dokumentos noteiktajām prasībām dzeramajam ūdenim. Ūdens drošību epidemioloģiskā ziņā nosaka kopējais mikroorganismu skaits un koliformu baktēriju skaits noteiktā tilpumā.

Ūdens kvalitāte centralizētas sistēmas dzeramā ūdens padeve tiek noteikta saskaņā ar sanitārajiem noteikumiem un noteikumiem. Dzeramajam ūdenim jābūt drošam epidemioloģiskā un radiācijas ziņā, drošam ķīmiskais sastāvs un tiem ir labvēlīgas organoleptiskās īpašības (12.1. tabula).

Rādītāji

* PFU – aplikumu veidojošās vienības.

12.1. Paraugu ņemšana un sagatavošana analīzei

Ūdeni sanitārajai un bakterioloģiskai kontrolei ņem 500 cm 3 pudelēs, kas iepriekš sterilizētas papīra maisiņos, ar kokvilnas marles aizbāzni, kas pārklāts ar papīra vāciņu.

Pirms paraugu ņemšanas krānu vai caurules malu sadedzina ar aizdedzinātu vates tamponu, kas samērcēts spirtā. Atveriet krānu un noteciniet ūdeni 10-15 minūtes, pēc tam paņemiet paraugu. Ūdens jāanalizē ne vēlāk kā 2 stundas pēc parauga ņemšanas.

Ūdens paraugi no atklātām ūdenskrātuvēm - akām, peldbaseiniem, upēm, ezeriem - tiek ņemti, izmantojot batometrus, kas ir metāla karkass ar masīvu svina dibenu - gremdēju. Metāla rāmī tiek ievietota pudele. Pudeļu mērītājs tiek iegremdēts iepriekš noteiktā dziļumā un pudele tiek atvērta, pavelkot aiz korķa piesietas virves. Pēc pudeles iepildīšanas pudeli izņem un aizver ar sterilu aizbāzni.

Hlorēta ūdens paraugus ņem pudelēs ar dehlorētāju, jo hlora ietekmē ūdenī esošie mikrobi mirst. Nātrija sulfīdu izmanto kā dehlorētāju ar ātrumu 10 mg uz 500 cm3 pārbaudāmā ūdens.

Savāktajiem ūdens paraugiem ir pievienots pavaddokuments, kurā norādīti attiecīgie dati. Dzeramā ūdens paraugus piegādā atdzesētos traukos 4 līdz 10 °C temperatūrā.

12.2. Kopējā ūdens mikrobu skaita noteikšana

Kopējais mikrobu skaits (TMC) - tas ir mezofīlo aerobo un fakultatīvo anaerobo mikroorganismu skaits, kas veido kolonijas uz gaļas peptona agara, uzsējot 1 cm 3 ūdens un pēc tam 48 stundas inkubējot kultūraugus 37 ± 0,5 ° C temperatūrā vairāk nekā 50 KVV/cm3.

Atkarībā no iespējamā piesārņojuma pakāpes tiek inokulēti vismaz divi dažādi ūdens tilpumi, kas atlasīti tā, lai uz traukiem augtu no 30 līdz 300 kolonijām. Krāna un artēzisko ūdeni sēj neatšķaidītu 1 cm3. Plkst bakterioloģiskie pētījumi piesārņotos ūdeņus sēj ar atšķaidītu ūdeni. Atšķaidījumus sagatavo, kā aprakstīts 8.3.

No testa parauga un no mēģenēm ar tā atšķaidījumiem atbilstoši paredzamā mikrobu piesārņojuma pakāpei ņem 1 cm 3, pievieno steriliem Petri trauciņiem un ielej 10-12 cm izkausētā un atdzesē līdz 45 ° temperatūrai. C gaļas peptona agars. Ar rokas apļveida kustībām, griežot krūzītes pa galda horizontālo virsmu, sadaliet to saturu vienmērīgā slānī pa visu apakšas laukumu. Pēc agara sacietēšanas plāksnes ar inokulācijām uz 24 stundām ievieto termostatā 37 °C temperatūrā. Pēc inkubācijas tiek skaitīts izaugušo koloniju skaits.

Mikrobu skaita noteikšana, izmantojot šo metodi, ļauj identificēt tikai mezofilos aerobos un fakultatīvos anaerobos mikroorganismus.

12.3. Koliformu baktēriju noteikšana ūdenī

No epidemioloģiskā viedokļa patogēno mikroorganismu noteikšana ūdenī ir īpaši svarīga. zarnu infekcijas(vēdertīfs, dizentērija, holēra utt.) Tomēr, tā kā patogēnos mikroorganismus ir ļoti grūti noteikt, bakterioloģiskās analīzes aprobežojas ar tā saukto sanitāro indikatīvo mikroorganismu (SIM) noteikšanu. Sanitārie indikatori ietver mikroorganismus, kas pastāvīgi atrodas cilvēku vai dzīvnieku dabiskajos dobumos. SPM klātbūtne dažādos vides objektos liecina par to piesārņojumu ar cilvēkiem. Jo vairāk SPM iekšā ārējā vide, jo lielāka ir konkrētu patogēnu klātbūtnes iespējamība infekcijas slimības.

Escherichia coli baktērijām (koliformām) ir vislielākā nozīme kā SPM. Escherichia coli grupā ietilpst ģints koliformas baktērijas Escherichia, Enterobacter, Citrobacter, Klebsiella, Serratia.

Nosakot SPM daudzumu ūdenī, tiek izmantoti šādi raksturlielumi:

. coli titrs - mazākais ūdens tilpums, kurā konstatēta viena E. coli. Dzeramajam ūdenim, kuram ir veikta attīrīšana, titrs coli jābūt vismaz 300 cm 3;

. coli indekss - E. coli skaits 1 dm3 ūdens. Koli indekss dzeramajam ūdenim nedrīkst būt lielāks par 3.

Koliformas baktērijas ūdenī nosaka, izmantojot membrānfiltra metodi vai fermentācijas metodi.

Fermentācijas metode. Fermentācijas metodes būtība ir inokulēt noteiktu daudzumu testa ūdens, inkubēt

kultūraugus 37 °C temperatūrā akumulācijas barotnēs, kam seko sēšana uz Endo barotnes, izaugušo koloniju diferenciācija un ticamākā koliformu skaita noteikšana 1 dm 3 ūdens.

Pētot ūdeni no centralizētās ūdensapgādes, pētāmais materiāls tiek potēts divas reizes trīs tilpumos: 100, 10 un 1 cm3. Lai pētītu upju, ezeru un dīķu ūdeni, sagatavo desmitkārtīgus atšķaidījumus 1:10, 1:100, 1:1000 un vēl 10 cm3 un 1 cm3 inokulē bez atšķaidīšanas. Ūdeni inokulē fermentācijas traukos (kolbās, pudelēs, mēģenēs ar pludiņiem), kas piepildītas ar glikozes-peptona Eijkman barotni. Kultūraugus 24 stundas inkubē termostatā 37 °C temperatūrā.

a) ja neveidojas gāze un mainās barotnes krāsa, sniedz negatīvu atbildi par koliformu klātbūtni testa ūdens tilpumā, dodot tiesības pabeigt pētījumu pēc 24 stundām;

b) kad veidojas skābe un gāze, materiāls tiek iesēts no fermentācijas traukiem uz Endo barotni. Sēšana tiek veikta ar bakterioloģisko cilpu biezā gājienā, lai iegūtu izolētas kolonijas. Traukus ar inokulācijām inkubē 37 °C temperatūrā 24 stundas. Pēc inkubācijas inokulācijas pārbauda. E. coli raksturīgo koloniju trūkums uz Endo barotnes dod pamatu sniegt noraidošu atbildi un izbeigt pētījumu;

c) ja Endo barotnē tiek konstatētas laktozes pozitīvas tumši sarkanas kolonijas ar metālisku spīdumu vai bez tā, nepieciešams noskaidrot, vai izaugušie mikroorganismi pieder pie zarnu baktēriju saimes. Šim nolūkam veic koloniju parauga mikroskopiju un veic oksidāzes testu.

Oksidāzes tests ierosināja diferencēt Enterobacteriaceae dzimtas baktērijas no gramnegatīvajām Pseudomonodaceae dzimtas baktērijām un citiem ūdens saprofītiem, kas atšķirībā no zarnu baktērijām ražo fermentu oksidāzi.

Lai veiktu oksidāzes testu, no Endo barotnes ar cilpu izņem 2-3 katra tipa kolonijas. Mikrobu masu uzvelk uz filtrpapīra, kas samitrināts ar speciālu reaģentu (30 g α-d-naftola izšķīdina 2,5 cm 3 etanola, pievieno 7,5 cm 3 destilēta ūdens un 40 mg dimetilparafenilēndiamīna. Šķīdumu sagatavots tieši pirms noteikšanas).

Ja oksidāzes testa rezultāts ir negatīvs, papīrs nemaina krāsu, saskaroties ar koloniju. Ja papīrs kļūst zils 1 minūtes laikā pēc saskares ar koloniju, oksidāzes tests tiek uzskatīts par pozitīvu.

Gramnegatīvu sporas neveidojošu stieņu klātbūtne preparātā, kam nav oksidāzes aktivitātes, ļauj nekavējoties sniegt atbildi par koliformu baktēriju klātbūtni ūdenī.

Ja Endo barotnē tiek konstatētas rozā un bezkrāsainas kolonijas, saskaitiet un subkultivējiet 2-3 katra tipa izolētas kolonijas Eijkmana glikozes-peptona barotnē. Kultūru inkubē 37 °C temperatūrā, ja veidojas skābe (barotnes krāsa) un gāze uzkrājas pludiņā, rezultāts tiek uzskatīts par pozitīvu, ja nav skābes un gāzu veidošanās , rezultāts tiek uzskatīts par negatīvu.

Pēc analīzes galīgos rezultātus (pozitīvos un negatīvos) katram inokulētajam tilpumam ieraksta laboratorijas žurnālā un nosaka koli titru un koli indeksu.

Membrānas filtra metode. Metodes būtība ir koncentrēt baktērijas no noteikta ūdens tilpuma uz membrānfiltriem, kam seko to audzēšana Endo barotnē 37 ° C temperatūrā, diferencējot audzētās kolonijas un saskaitot koliformu daudzumu 1 cm 3 ūdens. .

Membrānas filtru sagatavošana. Lai filtrētu ūdeni, izvēlieties membrānfiltrus Nr. 3, ievietojiet tos destilētā ūdenī, kas uzkarsēts līdz 80 ° C temperatūrai, un uzlieciet uz lēnas uguns, lai vārītos. Vārīšana tiek veikta trīs reizes 10 minūtes. Pēc pirmās un otrās vārīšanas ūdeni notecina, un pēc trešās filtrus atstāj ūdenī līdz lietošanai.

Filtra iekārtas sagatavošana. Filtra aparātu sterilizē autoklāvā vai noslauka ar spirtā samērcētu vates tamponu un apdedzina sterilizācijai. Membrānas filtrs tiek novietots uz filtra iekārtas galda, izmantojot sterilas pincetes. Lai nesabojātu filtru, novietojiet zem tā sterila filtrpapīra apli. Novietojiet un nostipriniet uz filtra galda ar uzliktajiem filtriem. augšējā daļa ierīce - piltuve (12.1. att.).

Rīsi. 12.1. Mikroorganismu skaita noteikšana ar membrānfiltra metodi

Ūdens filtrēšana un mikroorganismu audzēšana. Pārbaudāmo ūdens tilpumu sterili ielej filtra aparāta piltuvē un uztvērējā, izmantojot ūdens strūklas sūkni, izveido vakuumu. Analizējot dzeramo ūdeni, kas nonāk ūdens apgādes tīkls, nepieciešams ņemt vismaz 333 cm3 tilpumu. Filtrēšanas beigās membrānfiltrs ar liesmojošām pincetēm tiek pārnests uz Endo barotnes virsmu Petri trauciņos. Pašlaik tie ražo filtrus, kas piesūcināti ar atbilstošu uzturvielu barotni. Kultūras inkubē termostatā 37 °C 18-24 stundas.

Analīzes rezultātu apstrāde. Inkubācijas beigās kultūraugus pārbauda un izdara šādus secinājumus:

a) mikrobu augšanas trūkums uz filtriem vai koloniju noteikšana uz tiem, kas nav raksturīgas koliformām, ļauj pabeigt pētījumu šajā analīzes posmā ar negatīvu rezultātu par koliformu klātbūtni analizētajā ūdens tilpumā ;

b) ja uz filtra tiek konstatētas koliformām baktērijām raksturīgas kolonijas, pētījums tiek turpināts. Uztriepes sagatavo no vairākām katra veida kolonijām, iekrāso ar Gramu un pārbauda mikroskopā. Mazu gramnegatīvu sporu nenesošu nūjiņu neesamība uztriepes ir pamats analīzes pārtraukšanai ar negatīvu rezultātu par koliformu baktēriju klātbūtni testa ūdens tilpumā;

c) ja uztriepēs ir gramnegatīvi baciļi, morfoloģiski līdzīgi zarnu baciļiem, veic oksidāzes testu. Ja uz membrānfiltriem tiek atrastas tāda paša veida laktozes pozitīvas kolonijas (tumši sarkanas ar metālisku spīdumu vai bez tā), kas nerada oksidāzi, šajā posmā tiek pabeigta ūdens analīze un uz E. coli audzēto koloniju skaits. tiek skaitīts membrānas filtrs. Rezultātu izsaka kā coli indeksu 1 dm 3 ūdens izteiksmē;

d) ja uz membrānfiltriem konstatē sārtas un bezkrāsainas kolonijas, to skaitu saskaita un 2-3 izolētas katra tipa kolonijas subkultivē Eikmana glikozes-peptona barotnē. Pēc 3-4 stundu inkubācijas 37 °C temperatūrā tiek novērota barotnes krāsas maiņa, jo pludiņā veidojas skābe un gāze uzkrājas. Šajā gadījumā rezultāts tiek uzskatīts par pozitīvu. Ja vidē nav izmaiņu, tad tās dod negatīvu rezultātu koliformu baktēriju klātbūtnei.

Piemērs coli indeksa noteikšana: tika filtrēti trīs tilpumi 100 cm 3 ūdens. Pirmajā un otrajā filtrā izauga trīs kolonijas, bet trešajā - deviņas kolonijas. Kopā pieauga piecpadsmit kolonijas. Tādējādi pētāmā ūdens parauga koli indekss ir vienāds ar: (1000 x 15): 300 = 50. Koli indekss tiek pārveidots par kolītu šādā veidā: 1000:50 = 20.

Kontroles jautājumi

1. Kādus dzeramā ūdens epidemioloģiskās drošības rādītājus jūs zināt?

2. Kāds ir kopējais mikrobu skaits, kolitrs un koli indekss?

3. Kādas mikroorganismu ģintis ietilpst koliformās?

4. Kādas metodes izmanto koliformu baktēriju noteikšanai?

5. Kādi ir galvenie kritēriji, pēc kuriem nosaka koliformu baktēriju klātbūtni dzeramajā ūdenī?

6. Kāds ir oksidāzes testa mērķis?

Kopējais mikrobu skaits

Kopējais mikrobu skaits atspoguļo kopējo baktēriju līmeni ūdenī, nevis tikai tās, kas noteiktos kultivēšanas apstākļos veido kolonijas, kas redzamas ar neapbruņotu aci uz barības vielu barotnēm. Šie dati ir mazvērtīgi, lai noteiktu fekālo piesārņojumu, un tos nevajadzētu uzskatīt par svarīgu rādītāju, novērtējot dzeramā ūdens apgādes drošību, lai gan pēkšņs koloniju skaita pieaugums gruntsūdens avota ūdens analīzē var būt agrīns signāls par ūdens nesējslāņa piesārņojumu.

Kopējais mikrobu skaits ir noderīgs, lai novērtētu ūdens attīrīšanas procesu efektivitāti, jo īpaši koagulāciju, filtrēšanu un dezinfekciju, kur galvenais mērķis ir pēc iespējas samazināt to skaitu ūdenī. Kopējo mikrobu skaitu var izmantot arī, lai novērtētu sadales tīkla tīrību un integritāti, kā arī ūdens piemērotību ražošanai. pārtikas produkti un dzērieniem, kur mikroorganismu skaitam jābūt mazam, lai samazinātu bojāšanās risku. Šīs metodes vērtība ir spēja salīdzināt rezultātus, pārbaudot regulāri ņemtus paraugus no vienas un tās pašas ūdens padeves, lai noteiktu novirzes.

Kopējais mikrobu skaits, t.i., baktēriju koloniju skaits 1 ml dzeramā ūdens, nedrīkst būt lielāks par 50.

Ūdens kvalitātes virusoloģiskie rādītāji

Vīrusiem, kas izraisa īpašu pārnešanas risku pa ūdeni pie infekcijas slimībām pieder galvenokārt tās, kas vairojas zarnās un izdalās lielos daudzumos (desmitiem miljardu uz 1 g fekāliju) ar inficēto cilvēku izkārnījumiem. Lai gan vīrusa replikācija ārpus ķermeņa nenotiek, enterovīrusiem ir spēja izdzīvot ārējā vidē vairākas dienas un mēnešus. Īpaši daudz enterovīrusu ir notekūdeņos. Ūdens ņemšanas laikā ūdens attīrīšanas iekārtās ūdenī tiek konstatētas līdz 43 vīrusu daļiņām uz 1 litru.

Augstais vīrusu izdzīvošanas līmenis ūdenī un zemā infekciozā deva cilvēkiem izraisa epidēmijas uzliesmojumus vīrusu hepatīts un gastroenterīts, bet ar ūdens krājumiem, nevis dzeramo ūdeni. Tomēr šī iespēja joprojām ir potenciāli iespējama.

Jautājums par pieļaujamā vīrusu satura kvantitatīvo noteikšanu ūdenī ir ļoti sarežģīts. Vīrusu noteikšana ūdenī, īpaši dzeramajā ūdenī, arī ir sarežģīta, jo paraugu ņemšanas laikā pastāv iespēja nejauši inficēties ūdeni. IN Krievijas Federācija Saskaņā ar SanPiN vīrusu piesārņojuma novērtējums (kolifāgu satura noteikšana) tiek veikts, saskaitot kolifāgu radīto aplikumu veidojošo vienību skaitu. Tieša definīcija vīrusi ir ļoti grūti. Kolifāgi atrodas kopā ar zarnu vīrusiem. Fāgu skaits parasti ir lielāks par vīrusu daļiņu skaitu. Pēc izmēra kolifāgi un vīrusi ir ļoti tuvu, kas ir svarīgi filtrēšanas procesā. Saskaņā ar SanPiN 100 ml parauga nedrīkst būt plāksni veidojošas vienības.

Vienšūņi

No visiem zināmajiem vienšūņiem, kas ir patogēni cilvēkiem un tiek pārnesti caur ūdeni, amebiāzes (amebiskās dizentērijas), giardiazes un balantidiazes (ciliātu) izraisītāji var būt patogēni cilvēkiem. Tomēr šīs infekcijas reti sastopamas ar dzeramo ūdeni, tikai tad, kad tajā nonāk notekūdeņi. Visbīstamākā persona ir Giardia cistas rezervuāra avots-nesējs. Nokļūstot notekūdeņos un dzeramajā ūdenī, un pēc tam atkal cilvēka organismā, tie var izraisīt giardiozi, kas rodas hroniskas caurejas gadījumā. Iespējama nāve.

Saskaņā ar pieņemto standartu Giardia cistas nedrīkst novērot dzeramajā ūdenī ar tilpumu 50 litri.

Dzeramajā ūdenī nedrīkst atrasties helminti, kā arī to olas un kāpuri.

Saistībā ar ūdeni no dabiskas izcelsmes avotiem izšķir mikroorganismus - saprobiontus un katarobiontus, kas tiek uzskatīti par ūdenstilpju mikrobioloģiskā piesārņojuma indikatoru. Uz katarobiontu grupu(Katarobi) Tajos ietilpst mikroorganismi, kas dzīvo tikai tīrā avota ūdenī. Saprobiontu grupa(saprobes) veido visu pārējo saldūdens objektu mikrofloru.

Saprobitāti saucnoteikti fizioloģiskās īpašības specifisks mikroorganismu veids, kas nosaka to spēju dzīvot ar organiskiem savienojumiem piesārņotā ūdens vidē. Ūdenstilpju saprobitātes indeksus aprēķina, pamatojoties uz organismu, kas veido to mikrofloras kompleksu, atsevišķu sugu saprobitāti.

Zemāk esošajā tabulā parādīta dabisko rezervuāru tīrības klases un piesārņojuma līmeņa atkarība no to ūdens mikrobioloģiskajiem parametriem.

1. tabula

Mikrobioloģiskā piesārņojuma rādītāji ir piemērojami daudzām rūpniecības nozarēm. Prasības rezervuāru tīrībai regulē GOST, tehniskās specifikācijas (tehniskie nosacījumi) un cita normatīvā dokumentācija, un tām ir būtiskas atšķirības attiecībā uz dažādiem objektiem. Piemēram, peldbaseina darbība nav iespējama bez ražošanas kontroles programmas izstrādes. Tas jāsaskaņo ar attiecīgās administratīvi teritoriālās struktūrvienības Valsts sanitārās un epidemioloģiskās uzraudzības virsārstu un jāsaņem atļauja no organizācijas vadības, kura plāno ekspluatēt šo peldvietu.

2. tabula


3. tabula

Cienījamie kungi, ja Jums ir nepieciešamība koriģēt mikrobioloģiskā piesārņojuma rādītājus dabiskajā vai rūpnieciskajā ūdenī, lūdzu vērsieties pie uzņēmuma speciālistiem Ūdensvīrs. Izstrādāsim optimālu ūdens dezinfekcijas shēmu.

Ūdens, kā arī ķīmisko vielu neatbilstība padara to nederīgu dzeršanai. Ja jūsu ūdens apgādes avots nav aizsargāts no tiešas vides ietekmes vai inženierkomunikācijas ir novecojušas vai ilgstoši nav tīrītas, tad mikrobioloģiskā pārbaude ir vienkārši nepieciešama. No tā ir atkarīga jūsu veselība un drošība! Tas ir īpaši svarīgi tiem, kas izmanto aku. – zeme, tas ir tiešā saskarē ar augsni, kas nozīmē, ka tas draud “izdzert” jūs ar nitrātiem, smagajiem metāliem, amonjaku un, protams, kaitīgām organiskām vielām, kas nonāk augsnē lauksaimniecības saimniecību darbības rezultātā. vai zemes.

1. tabulā ir parādīti pašreizējā SanPiN 2.1.4.1074-01 standarta dzeramajam ūdenim mikrobioloģiskie rādītāji:

1. tabula. Mikrobioloģiskie standarti dzeramajam ūdenim

Standarta mikrobioloģiskā analīze

Standarta dzeramā ūdens mikrobioloģiskā analīze Maskavas Valsts universitātē ietver trīs rādītāju noteikšanu: kopējo mikrobu skaitu, kopējo koliformu un termotolerantu koliformu baktēriju.

Uzlabota mikrobioloģiskā analīze

Uzlabotā mikrobioloģiskā ūdens analīze ietver piecu indikatoru analīzi: kopējais mikrobu skaits, kopējais koliformu baktēriju skaits, termotolerantu koliformu baktēriju skaits, kolifāgu titrs un sulfītu reducējošo baktēriju sporu saturs.

Virszemes ūdensobjektu (dīķu, upju, baseinu) mikrobioloģiskā analīze

Mūsu īpašumā vai tuvumā bieži vien ir ūdenstilpes, kur mēs un mūsu bērni labprāt pavadām laiku. Protams, ūdens šajos rezervuāros nav dzerams, taču tā drošība cilvēkiem, tāpat kā dzeramā ūdens, ir regulēta. 2. tabulā ir parādīti spēkā esošā virszemes ūdeņu aizsardzības higiēnas prasību standarta (SanPiN 2.1.5.980-00) mikrobioloģiskie rādītāji.

2. tabula. Mikrobioloģiskie standarti ūdens izmantošanai atpūtai, kā arī apdzīvotās vietās

Standarta mikrobioloģiskā analīze (virszemes ūdensobjekti)

Dzeršanai neparedzētā ūdens mikrobioloģiskā analīze ietver divu indikatoru daudzuma noteikšanu: kopējo koliformu un koliformu termotolerantu baktēriju.

Uzlabota mikrobioloģiskā analīze (virszemes ūdensobjekti):

Papildus diviem galvenajiem rādītājiem mēs ierosinām veikt papildu analīzi par saturu: kolifāgi, oportūnistiskie raugi un mikromicīti (bieži oportūnistisko slimību pavadoņi) un rezervuāra pašattīrīšanās indekss.

Salmonella un Enterococcus ģints baktēriju noteikšana

Ja tiek būtiski pārsniegti SanPiN 2.1.5.980-00 standarti, kā arī iespējams rezervuāra piesārņojums ar fekālijām, mēs iesakām veikt zarnu infekciju patogēnu (Salmonella un Enterococcus ģints) klātbūtnes analīzi.

Glosārijs

Kopējais mikrobu daudzums (TMC)

Metode nosaka dzeramajā ūdenī kopējais skaits mezofīlie aerobie un fakultatīvi anaerobie mikroorganismi (FAM), kas spēj veidot kolonijas uz barības vielu agara 37 ° C temperatūrā 24 stundas, redzamas ar 2-kārtīgu palielinājumu. Šis indikators identificē iespējamās baktērijas, kas var kaitēt cilvēku veselībai.

Parastās koliformās baktērijas (TCB)

Parastās koliformās baktērijas (TCB) ir gramnegatīvas, oksidāzes negatīvas, sporas neveidojošas nūjiņas, kas spēj augt diferenciālā laktozes barotnē, fermentējot laktozi skābē, aldehīdā un gāzē (37+1) °C temperatūrā ( 24-48) stundas. Daudzi šīs grupas pārstāvji ir mikroorganismi normāla mikroflora kuņģī, tāpēc šīs mikroorganismu grupas pārpalikums var liecināt par iespējamu antropogēno (arī fekālo) ūdens piesārņojumu.

Termotolerantās koliformās baktērijas (TCB)

Termotolerantās koliformās baktērijas (TCB) ir vienas no izplatītākajām koliformajām baktērijām, tām ir visas to īpašības un turklāt tās spēj fermentēt laktozi līdz skābei, aldehīdam un gāzei (44 ± 0,5) ° C temperatūrā 24 stundas. Tāpat kā OKB, tie ir indikatoru grupa, bet ir stabilāki vidi: Tāpēc šīs mikroorganismu grupas noteikšana ūdenī var liecināt par tās nepārprotamu piesārņojumu ar cilvēku atkritumiem.

Kolifāgi

Kolifāgi, kas noteikti ar standarta metodi (MUK 4.2.1018-01), ir E. coli vīrusi (Escherichia coli), un epidemiologi tos uzskata par papildu un dažkārt jutīgāku metodi ūdens piesārņojuma noteikšanai ar E. coli mikroorganismiem. Vīrusu daļiņas un jo īpaši kolifāgi ir izturīgāki pret vidi nekā to baktēriju saimnieki. Šajā sakarā kolifāgu klātbūtne var kalpot kā uzticams rādītājs vecākam ūdens avota fekāliju piesārņojumam. Ir pierādīta tieša korelācija starp kolifāgu saturu ūdenī un cilvēkiem bīstamajiem enterovīrusiem, tāpēc kolifāgu klātbūtne ūdenī var liecināt par avota vīrusu piesārņojumu. Aktīvs normatīvais dokuments(SanPiN 2.1.4.1074-01) nozīmē, ka 100 ml ūdens nav kolifāgu.

Sulfītus samazinošas klostrīdiju sporas

Sulfītus reducējošās klostrīdijas ir sporas veidojoši anaerobie nūjiņveida mikroorganismi, kas ir papildu mikrobioloģiskais indikators rezervuāra fekāliju piesārņojumam. Atšķirībā no relatīvi nestabilajām koliformām un termotolerantajām koliformām baktērijām, klostrīdiju sporas ūdenstilpēs var saglabāties ilgu laiku. Klostridijas ir atrodamas cilvēku un mājdzīvnieku zarnās, tomēr, ja tās tiek uzņemtas ar ūdeni lielos daudzumos var izraisīt saindēšanās ar ēdienu. Pie sulfītu reducējošām klostrīdijām pieder arī cilvēkiem bīstamās klostridijas (Clostridium botulinum, Clostridium perfringens, Clostridium tetani), kas izraisa smagas slimības. Saskaņā ar pašreizējo standartu (SanPiN 2.1.4.1074-01) 20 ml ūdens nedrīkst būt klostrīdiju sporas.

Oportūnistiskie raugi un mikromicīti

Oportūnistiskie raugi un mikromicīti (pelējums) ietver lielu heterogēnu sēnīšu organismu grupu, kas var augt saprotrofiski 37 °C temperatūrā. Tajā ietilpst tādi pārstāvji kā Candida albicans un Cryptococcus neoformans, kas ir kopīgs faktors oportūnistiskās slimības cilvēkiem, izraisot kandidozi ( sēnīšu slimībasāda), piena sēnīte utt. Citi mikromicētu organismi (Cladosporium cladosporioides, Aspergillusniger) var būt aktīvi sensibilizatori alerģiskas reakcijas, un dažreiz arī paši alergēni. Krievijas Federācijā ūdens nav regulēts attiecībā uz pelējuma un rauga organismiem ūdenī.

Pašattīrīšanās indeksa noteikšana (no MUK 4.2.1884-04)

Kopējais mikroorganismu skaits ūdenskrātuvju ūdenī atpūtas zonās nav standartizēts, jo šīs mikroorganismu grupas līmenis lielā mērā ir atkarīgs no katra objekta dabiskajām īpašībām, gada laika utt.

Taču, izvēloties jaunu ūdens apgādes avotu vai atpūtas vietu ūdenskrātuvju ūdenī, papildus nepieciešams noteikt kopējo mikrobu skaitu, kas palielinās:

  • 37 °C temperatūrā 24 stundas;
  • 22 °C temperatūrā 72 stundas.

Tiek uzskatīts, ka:

  1. TMC pie 37 °C lielākoties pārstāv alohtona mikroflora (ievadīta rezervuārā antropogēna piesārņojuma, tai skaitā fekāliju) rezultātā;
  2. TMC 20-22 °C temperatūrā papildus alohtonam pārstāv dabiskā mikroflora (dabiska, raksturīga konkrētam rezervuāram).

Šo mikroorganismu grupu skaita attiecība ļauj spriest par pašattīrīšanās procesa intensitāti. Pašattīrīšanās procesa beigās TMC koeficients ir 22 °C / TMC ir 37 °C. Sadzīves notekūdeņu piesārņojuma vietās abu grupu skaitliskās vērtības ir tuvas.

Indikators ļauj iegūt papildu informāciju par ūdenstilpņu sanitāro stāvokli, piesārņojuma avotiem, pašattīrīšanās procesiem.

Krāna ūdeni inokulē 1 cm3 (1 ml) tilpumā. Paraugu pievieno sterilai Petri trauciņai, ielej 10-12 ml izkausēta un atdzesēta līdz 45°C uzturvielu agara un sajauc ar ūdeni. Inokulāciju inkubē 37°C 1-2 dienas. Tad saskaita un aprēķina barotnes virspusē un dziļumos izaugušo koloniju skaitu ūdens mikrobu skaits- mikroorganismu skaits 1 ml.

Titrēšanas metode
Lai pētītu krāna ūdeni, inokulējiet trīs tilpumus 100 ml, trīs tilpumus 10 ml un trīs tilpumus 1 ml glikozes-peptona barotnē. Kultūraugus inkubē 24 stundas 37°C temperatūrā. Fermentāciju vērtē pēc gāzes burbuļu klātbūtnes pludiņā. Fermentēti vai duļķaini paraugi tiek inokulēti uz Endo barotnes.
No izaudzētajām kolonijām veido uztriepes, krāso ar Gram un veic oksidāzes testu, kas ļauj atšķirt ģinšu baktērijas Escherichia, Citrobacter Un Enterobaktērija no ģimenes gramnegatīvajām baktērijām Pseudomonadaceae un citas ūdenī dzīvojošas oksidāzes pozitīvas baktērijas.
Coli titrs ūdeni mēra pēc minimālā ūdens daudzuma (ml), kurā tiek konstatētas koliformas baktērijas, coli indekss - koliformu daudzums 1 litrā testa ūdens.

Gaisa mikrobu skaita noteikšana

Kvantitatīvās mikrobioloģiskās metodes gaisa izpētei ir balstītas uz nogulsnēšanas (sedimentācijas), aspirācijas vai filtrēšanas principiem.
Sedimentācijas metode. Divus Petri trauciņus ar uzturvielu agaru atstāj atvērtus uz 60 minūtēm, pēc tam kultūraugus inkubē termostatā 37°C temperatūrā. Rezultātus vērtē pēc kopējā abos ēdienos izaudzēto koloniju skaita: ja ir mazāk par 250 saimēm, gaiss tiek uzskatīts par tīru; 250-500 kolonijas - vidēji piesārņotas, ar vairāk nekā 500 kolonijām - piesārņotas.
Aspirācijas metode- precīzāka kvantitatīvā metode gaisa mikrobu skaita noteikšanai. Gaisa sēšana tiek veikta, izmantojot instrumentus (Krotova ierīci un PAB-1 paraugu ņemšanu).
Krotova aparāts ir konstruēts tā, lai gaiss noteiktā ātrumā izplūstu caur šauru organiskā stikla plāksnes spraugu, kas pārklāj Petri trauciņu ar barības vielu agaru. Šajā gadījumā aerosola daļiņas ar mikroorganismiem, kas tajās atrodas, vienmērīgi tiek fiksētas uz visas barotnes virsmas, jo tasīte pastāvīgi griežas zem ieejas spraugas.
Pēc ražas inkubācijas termostatā tiek aprēķināts mikrobu skaits

Sterilizācijas metodes

  • Siltums: tvaiks un gaiss (sausais siltums)
  • Ķīmiskā viela: gāze vai ķīmiskie šķīdumi (sterilanti)
  • Plazma (ūdeņraža peroksīda plazma)
  • Radiācijas sterilizācija - tiek izmantota rūpnieciskā versijā
  • Membrānas filtra metode - izmanto, lai iegūtu nelielu daudzumu sterilu šķīdumu, kuru kvalitāte var krasi pasliktināties citu sterilizācijas metožu ietekmē (bakteriofāgs, selektīvās barotnes, antibiotikas)

Termiskās sterilizācijas metodes

Termiskās sterilizācijas metodes priekšrocības:

  • Uzticamība
  • Nav nepieciešams izņemt sterilizatorus no medicīnas piederumiem
  • Personāla ērtības
  • Sterilizācija tiek veikta iepakojumos, kas ļauj saglabāt sterilitāti noteiktu laiku.

Tvaika sterilizācija

To veic, padodot piesātinātu ūdens tvaiku zem spiediena tvaika sterilizatoros (autoklāvos).

Visvairāk tiek uzskatīta tvaika spiediena sterilizācija efektīva metode, jo augstāks spiediens, jo augstāka ir tvaika temperatūra, kas sterilizē materiālu; Tvaika baktericīdās īpašības ir augstākas nekā gaisam, tāpēc sterilizācijai izmanto pārsātinātu tvaiku.

Izstrādājumi, kas izgatavoti no tekstilizstrādājumiem (lins, vate, pārsēji, šuvju materiāls), gumijas, stikla, dažiem polimērmateriāliem, uzturvielu barotnēm un medikamentiem, tiek pakļauti tvaika sterilizācijai.


Saistītā informācija:

  1. Tehnoloģisko mainīgo attiecību analīze, procesu vadības pamatprasību noteikšana, kvalitātes kritēriju un vadības mērķu formulēšana.
  2. Ugunsgrēku skaita dinamikas analīze 2010.-2014.gadam. un ugunsgrēku skaita prognozi 2015. gadam
  3. Ugunsgrēku skaita analīze 3 ROND apkalpotajā teritorijā laika posmā no 2010.-2014.
  4. Stenokardija: 1) definīcija, etioloģija un patoģenēze 2) klasifikācija 3) patoloģiskā anatomija un dažādu formu diferenciāldiagnoze 4) lokālas komplikācijas 5) vispārējās komplikācijas