Šobrīd izstrādātas datorizētas sistēmas, automātiski vada baktēriju izolēšana no testa paraugiem un to jutības noteikšana pret dažādām zālēm. To galvenā priekšrocība ir bakterioloģiskās laboratorijas personāla atbrīvošana no liela apjoma ikdienas pētījumiem un skaidra iegūto rezultātu standartizācija.

Šo ierīču plašā izmantošana vietējā praksē ierobežo to izmaksas. Starp pieejamākajām metodēm ir visizplatītākās Alamar sistēma Un E-tests, apvienojot sērijas atšķaidīšanas metodes un diska metodes priekšrocības.

Jaunas metodes baktēriju jutības noteikšanai pret ķīmijterapiju. Automātiskās sistēmas sērijveida atšķaidīšanas metodes rezultātu reģistrēšanai">

Automātiskās sistēmas sērijveida atšķaidīšanas metodes rezultātu reģistrēšanai(piemēram, Baxter MicroScan AutoSCAN-4) - automatizētas inkubācijas sistēmas ar iebūvētiem fotometriem, kas nefelometriski fiksē baktēriju augšanu vai tās neesamību 24 stundas pēc mikroorganismu ievadīšanas mikropaneļu iedobēs. Darbības princips ir balstīts uz barotnes optiskā blīvuma atšķirību ņemšanu vērā iedobēs, kurās ir baktēriju vairošanās, un iedobēs, kurās augšanas nav. Šobrīd ir izstrādātas ierīces (piemēram, VITEK), kas nodrošina rezultātu 4-10 stundu laikā.

Alamar sistēma ir panelis ar iedobēm, katrā no tām ir filtrpapīra diski, kas satur dažādu koncentrāciju pretmikrobu līdzekļus un ir piesūcināti ar Alamar Blue indikatoru. Pēc baktēriju ievadīšanas akā disks kļūst zils, un, to tālākai augšanai, tā krāsa mainās uz rozā. Disku ievietošanas secība iedobēs atbilst zāļu dubultajiem sērijveida atšķaidījumiem. Pēdējā iedobe ar zilu disku, kas atrodas pirms iedobēm ar sārtiem diskiem, atbilst zāļu MIC.

E-tests[no angļu valodas elipse, elipse, jo jutības klātbūtnē veidojas eliptiskas formas augšanas kavēšanas zona] - diska metodes modifikācija, bet pēdējā vietā tiek izmantotas filtrpapīra sloksnes, kas piesūcinātas ar dažādu koncentrāciju zālēm, katra no šīm zonām ir atbilstošs marķējums. Sloksnes novieto uz agara virsmas. Ja baktērijas ir jutīgas pret zāļu iedarbību, ap sloksnes zonām, kas satur tās inhibējošās koncentrācijas, veidojas elipsoidāla zona. Tās forma ir saistīta ar vairāku zāļu koncentrāciju darbību vienlaikus. MIC atbilst sloksnes sadaļai, kurā to šķērso augšanas kavēšanas zonas robeža.

E-tests) ir vispāratzīta metode, lai pārbaudītu jutību pret antibiotikām laboratorijās visā pasaulē. To plaši izmanto rezistences pētījumos gan diagnostikas, gan testēšanas klīnikās. Pārbaude ir kvantitatīvā noteikšanas metode MIC pretsēnīšu un antibakteriālie līdzekļi infekcijas izraisītājiem, tostarp septiskiem, kas ir īpaši svarīgi smagi slimiem pacientiem. Pašlaik šai metodei ir vairāk nekā 100 antibiotiku, lai pārbaudītu virkni aerobo baktēriju un izsmalcinātu organismu, piemēram, pneimokoku, Haemophilus influenzae, H. pylori, meningokoku, gonokoku, anaerobus, sēnītes un mikobaktērijas. E-tests dod iespēju racionāli lietot antibiotikas, kas sniedz vislabākos rezultātus pacientiem, kā arī koriģēt ārstēšanas shēmu pēc empīriskas medikamentu izrakstīšanas. Tests ir ārkārtīgi svarīgs, lai noteiktu antibiotiku devu pacientiem ar topogrāfiski grūti sasniedzamām infekcijas vietām (piem., endokardīts), dažām nozokomiālām infekcijām, hroniskām infekcijām un pacientiem ar imūndeficītu.

E-tests- unikāla patentēta tehnoloģija. Tās princips ir tāds, ka uz plastmasas teststrēmeles tiek uzklāti secīgi antibiotikas atšķaidījumi no mazākas uz lielāku un ļauj precīzi noteikt no vismaz 15 atšķaidījumiem baktēriju līdzekļu pretmikrobu aktivitāti, gan dīvaino, gan neparasto.

Testa procedūra ir vienkārša: uz inokulēta agara virsmas no standarta atšķaidījuma novieto sloksni ar reaģentu. Pēc inkubācijas rezultātu nolasa, izmantojot atšķaidīšanas skalu, kas uzlikta uz plāksnes augšanas kavēšanas zonas krustpunktā elipses veidā ar testa strēmeli.

E-tests ir vairākas priekšrocības pretestības uzraudzībā, jo tajā ir koncentrācijas gradients, kas var parādīt vismazākās jutības izmaiņas. Šī testa koncentrācijas gradienta platums jutīgi aptver izmaiņas mikroorganismu rezistenci un nosaka gan zemu, gan augstu rezistences līmeni.

Šis ir visjutīgākais šodien pieejamais tests. E-tests ir makrometode, ko var viegli ieviest laboratorijā, lai noteiktu jutīgumu. Laikā, kad tiek atklātas arvien jaunas infekcijas un pieauga mikroorganismu rezistence pret antibakteriāliem līdzekļiem, E-tests visā pasaulē atzīts par galveno inovāciju antimikrobiālās aktivitātes noteikšanā.

Biomerye katalogs 2013 33. - 36. lappusē satur pilnu E-testu sarakstu (100 vienības):

• Antibakteriāls
• Pretsēnīšu līdzeklis
• Prettuberkuloze
• Lai noteiktu vairāku zāļu rezistenci

	Vārds	kat. Nē.
	pretsēnīšu līdzeklis	20306
		19364
		20307
		20457
		21040
		21053
		21055
		19361
		19362
	Folijas iepakojumā ir putu kārtridžs ar 30 sloksnēm un desikants; Uzglabāt 2-8°C vai kontrolētā telpā. t°С	19363
	iepakojums ir blisteris (plastmasas sekciju iepakojums), kas sastāv no 10 šūnām, katrā no kurām ir 3 sloksnes (antibakteriāls). Uzglabāšana -20°C	19365
	Iepakojums ir blisteris (plastmasas sekciju iepakojums), kas sastāv no 10 šūnām, katrā šūnā ir 3 sloksnes (antibakteriāls). Uzglabāšana -20°C	19366
	Iepakojums ir blisteris (plastmasas sekciju iepakojums), kas sastāv no 10 šūnām, no kurām katra satur 3 sloksnes (antibakteriāla). Uzglabāšana -20°C	19359
	Folijas iepakojumā ir putu kārtridžs ar 30 sloksnēm un desikants; Uzglabāt 2-8°C vai kontrolētā telpā. t°С	19371
	Folijas iepakojumā ir putu kārtridžs ar 30 sloksnēm un desikants; Uzglabāt 2-8°C vai kontrolētā telpā. t°С	19375
	Folijas iepakojumā ir putu kārtridžs ar 30 sloksnēm un desikants; Uzglabāt 2-8°C vai kontrolētā telpā. t°С	19374
	Folijas iepakojumā ir putu kārtridžs ar 30 sloksnēm un desikants; Uzglabāt 2-8°C vai kontrolētā telpā. t°С	19373
	Iepakojums ir blisteris (plastmasas sekciju iepakojums) ar 10 šūnām, katrā šūnā ir 3 sloksnes (antibakteriāls). Uzglabāšana -20°C	19372
	Iepakojums ir blisteris (plastmasas sekciju iepakojums) ar 10 šūnām, katrā šūnā ir 3 sloksnes (antibakteriāls). Uzglabāšana -20°C	19370
	Folijas iepakojumā ir putu kārtridžs ar 30 sloksnēm un desikants; uzglabāšana 2-8°C vai kontrolētā telpā. t°С	19360

Diska difūzijas metode

Ne vairāk kā 6 diski, kas piesūcināti ar antibiotikām, tiek novietoti uz blīvas barotnes virsmas, kas iesēta virs nepārtraukta zāliena ar pētāmo kultūru, vismaz 2 cm attālumā viens no otra. Rezultātus reģistrē pēc 18-24 stundu inkubācijas termostatā atbilstoši neaugšanas zonas diametram ap diskiem ar antibiotikām. Augšanas klātbūtne ap disku norāda uz šī mikroba nejutīgumu pret antibiotiku. Rezultātu interpretācijai tiek izmantotas īpašas tabulas.

1. attēls. Jutības noteikšana

mikroorganismi, izmantojot diska difūzijas metodi:

1 – mikroorganisms jūtīgs uz antibiotiku;

2 – mikroorganisms vidēji izturīgs uz antibiotiku;

3 – mikroorganisms stabils uz antibiotiku.

E-testa metode

Metodes princips. Mikroorganisma jutības noteikšana tiek veikta līdzīgi kā testēšana ar diska difūzijas metodi. Atšķirība ir tāda, ka antibiotiku diska vietā tiek izmantota E-testa sloksne, kas satur antibiotiku koncentrācijas gradientu no maksimālās līdz minimumam. Augšanas inhibīcijas elipsoidālās zonas krustpunktā ar E-testa strēmeli tiek iegūta minimālās inhibējošās koncentrācijas (MIC) vērtība.

2.attēls Mikroorganismu jutības noteikšana, izmantojot E-testus

Sērijas atšķaidīšanas metode buljona vidē

Mēģenēs, kas satur 1 ml Muellera-Hintona buljona, pagatavo antibakteriālo zāļu sērijveida divkāršus atšķaidījumus, piemēram, 100 µg/ml - 1., 50 µg/ml - 2., 25 µg/ml - 3., 12,5 µg/ml. – 4. utt. Pēc tam katrā mēģenē pievieno 0,1 ml pārbaudītās baktēriju suspensijas. Tajā pašā laikā tiek ievadīta augšanas kontrole (1 ml Mueller-Hinton buljona un 0,1 ml baktēriju suspensijas). Kultūraugus inkubē 37°C 18-24 stundas, pēc tam atzīmē rezultātus. Duļķainības trūkums barotnē norāda uz baktēriju augšanas aizkavēšanos noteiktas zāļu koncentrācijas klātbūtnē.

3. attēls. MIC vērtības noteikšana, atšķaidot šķidrā barotnē

Minimālā inhibējošā koncentrācija (MIC) ir zemākā antibiotikas koncentrācija (μg/ml vai mg/l), kas pilnībā inhibē redzamu baktēriju augšanu in vitro.

2 Dažādu stafilokoku celmu jutības noteikšana pret antibiotikām, izmantojot standarta diska metodi

Pētāmā kultūra ir jutīga pret _______________________________________________________

vidēji izturīgs pret ____________________________________________________________________________,

izturīgs pret ______________________________________________________________________________________.

3 Penicilīna minimālās inhibējošās koncentrācijas (MIC) noteikšana ar sērijveida atšķaidījumu metodi.

Secinājums: Penicilīna MIC pētāmajam celmam ir __________________________________________

Metodes priekšrocības:______________________________________________________________________________________

Metodes trūkumi:______________________________________________________________________________________

4 Dažādu veidu baktēriju antagonistiskās iedarbības identificēšana un reģistrācija.

Antagonists mikrobs un testa celmi, kas ir perpendikulāri tam, tiek inokulēti ar svītru gar diametru uz plāksnes ar MPA. Rezultātus reģistrē vienu dienu pēc sēšanas. Antagonistiskās iedarbības klātbūtni un pakāpi nosaka testa kultūru augšanas inhibīcijas zonu lielums.

Līnijas sēšana_____________________________________

Secinājums: vislielākā antagonistiskā iedarbība tika konstatēta testa celmiem (norādīt sugu) _____________________________________________________________________________________________________

NODARBĪBA Nr.8

TĒMA: NOBEIGUMA NODARBĪBA PAR TĒMU: “MIKROORGANISMU MIKROBOLOĢIJAS, MORFOLOĢIJAS, FIZIOLOĢIJAS UN ĢENĒTIKAS ATTĪSTĪBAS VĒSTURISKIE POSMI”.

Īsto baktēriju formas un izmēri. Īsto baktēriju sfērisko, stieņveida un vītņu formu raksturojums.

Baktēriju struktūra. Galvenās atšķirības starp prokariotu šūnu un eikariotu šūnu.

Grampozitīvo un gramnegatīvo baktēriju šūnu siena.

Mikroskopisko preparātu veidi. Fiksēto preparātu sagatavošanas tehnika.

Mikroskopijas tehnika gaismas mikroskopā. Mikroorganismu morfoloģijas izpēte elektronu mikroskopā.

Mikrobu tintoriālās īpašības. Krāsvielas. Vienkāršas fiksēto preparātu krāsošanas metodes.

Patogēno prokariotu klasifikācijas principi (Burgee, 2001).

Aizsardzības līdzekļi mikroorganismos. Sporas, sporu veidošanās stadijas un apstākļi, bioloģiskā nozīme.

Baktēriju kapsulas, to nozīme.

Flagellas, to uzbūve. Sīlija. Seksa dzeršana.

Sarežģītas krāsošanas metodes. Gram, Ziehl-Neelsen, Burri-Gins, Neisser krāsošanas metodes.

Mikroorganismu izpētes metodes dzīvā stāvoklī. CON tests. Metodes princips.

Spirohetes. Spirohetu sistemātiskais novietojums un morfoloģija. Ultrastruktūras un ķīmiskā sastāva iezīmes. Pētījuma metodes.

Aktinomicīti, morfoloģija, ultrastruktūra, ķīmiskais sastāvs. Patogēnas sugas. Aktinomicītu loma dabā un medicīnā. Atklāšanas metodes.

Hlamīdiju taksonomija. Morfoloģija, struktūra, noteikšanas metodes. Hlamīdiju attīstības cikls.

Riketijas, morfoloģija, ultrastruktūra, ķīmiskais sastāvs. Patogēnas sugas.

Mikoplazmas. Klasifikācija. Filoģenēze. Noteikšanas metodes.

Mikrobu defektīvās formas: protoplasti, sferoplasti, L formas.

Baktēriju uzturs. Uzturvielas ir oglekļa un slāpekļa avoti. Baktēriju klasifikācija pēc uztura veida Autotrofi un ķīmijorganotrofi

Izaugsmes faktori un to avoti. Minerālu elementu avoti.

Barības vielu pārneses caur membrānu metodes un mehānismi.

Baktēriju enerģijas prasības. Enerģijas iegūšanas veidi no autotrofiem (fotosintēze, ķīmiskā sintēze). Enerģijas avoti un iegūšanas veidi ķīmijorganotrofos.

Aerobie un anaerobie bioloģiskās oksidācijas veidi baktērijās. Aerobās, anaerobās, fakultatīvās anaerobās un mikroaerofīlās baktērijas. Anaerobo apstākļu radīšanas metodes.

Bakterioloģiskās (kultūras) pētījumu metodes mērķi, posmi, priekšrocības un trūkumi.

Mikroorganismu augšana un vairošanās. Reprodukcijas metodes. Binārais (vienkāršais) skaldīšanas mehānisms. Baktēriju populāciju pavairošana.

Baktēriju audzēšanas principi un metodes. Mikrobu vajadzības pēc uztura.

Barības barotnes baktēriju audzēšanai. Prasības barības vielu barotnēm. Barības vielu barotņu klasifikācija.

Baktēriju kultivēšanas nosacījumi un paņēmieni. Sēšanas tehnika uz barības vielu barotnēm. Baktēriju augšanas modeļi un raksturs uz cietām un šķidrām barotnēm.

Aerobo un anaerobo baktēriju tīrkultūru izolēšanas metodes.

Izolētu kultūru identificēšanai izmantoto mikroorganismu īpašības.

Baktēriju fermenti, klasifikācija. Mikroorganismu bioķīmisko īpašību izpētes metodes. Bioķīmiskās aktivitātes praktiska izmantošana baktēriju identificēšanā

Saharolītisko īpašību noteikšana, Hiss barotnes sastāvs; proteolītisko īpašību noteikšana, katalāzes un oksidāzes aktivitātes noteikšana.

Baktēriju kultūru automātiskās identificēšanas ierīču (hemokultivators, automātiskais analizators) darbības princips un lietošanas iezīmes.

Riketsijas un hlamīdiju audzēšanas iezīmes.

Bakteriofāgi (fāgi). Atklājumu vēsture. Fāgu morfoloģija, struktūras īpatnības, ķīmiskais sastāvs un īpašības.

Virulentie fāgi. Mijiedarbības fāzes ar baktēriju šūnu. Fāga un šūnas mijiedarbības rezultāti. Mēreni fāgi. Profāgs. Lizogēnijas fenomens. Fāgu konversija.

Bakteriofāgu izolēšanas un titrēšanas metodes uz cietām un šķidrām barotnēm Fāgu pielietojums mikrobioloģijā un medicīnā. Fāgu diagnostika un fāgu tipizēšana.

Iedzimtība. Ģenētiskā aparāta organizācija baktērijās (nukleoīds, plazmīdas, Ir

-sekvences, transpozoni).

Baktēriju genoma funkcionēšanas principi. Operona organizācija. Genotips un fenotips.

Mikrobu mainīgums. Modifikācijas baktērijās, nozīme, galvenās izpausmes un īpašības (neiedzimtība, pielāgošanās spēja, augsts tiešu un reverso izmaiņu biežums, daudzi inducējoši faktori).

Genotipiskā mainīgums. Mutācijas un to klasifikācija. Mutagēni. Mutāciju fenotipiskās izpausmes. Mutantu liktenis. Disociācija baktērijās. Atlases ietekme. Genoma bojājumu labošanas sistēma.

Rekombinācijas mainīgums. Kombinēto genomu veidošanās mehānismi. Individuālo īpašību izmaiņu biežums. Transformācija, transdukcija, konjugācija.

Zināšanu par mikrobu ģenētiku praktiskā nozīme. Ģenētiskās kartēšanas principi.

Ģenētiskās analīzes metodes (molekulārā hibridizācija, polimerāzes ķēdes reakcija, blotēšana, sekvencēšana).

Gēnu inženierijas jēdziens un tās metožu izmantošana mikrobioloģijā un biotehnoloģijā. Ģenētiski modificētu vakcīnu un citokīnu ražošana un izmantošana.

Pretmikrobu pasākumi. Vides faktoru ietekme uz mikrobiem. Fizisko faktoru (temperatūra, žāvēšana, starojums, ultraskaņa, osmotiskais spiediens) darbība. Ķīmisko faktoru darbība.

Sterilizācijas un dezinfekcijas mērķi, metodes, līdzekļi un objekti medicīnas un mikrobioloģiskajā praksē. Dezinfekcijas kvalitātes kontrole. Sterilizācijas un sterilitātes kontrole. Izpildes metodes.

Antiseptisks līdzeklis. Definīcija. Antiseptiskie līdzekļi, prasības, izcelsme, īpašības, grupas, darbības mehānismi uz mikrobiem. Antiseptiķu veidi. Terapeitiskie antiseptiķi. Profilaktiski antiseptiķi.

Ķīmijterapijas zāles. Īpašības. Galvenās ķīmijterapijas zāļu grupas. Baktēriju iedarbības mehānismi. Selektivitātes jēdziens un darbības “mērķi”.

Antibiotikas. Definīcija. Antibiotiku ražotāji. Sintētiskās un daļēji sintētiskās antibiotikas.

Galvenās antibiotiku grupas pēc ķīmiskās struktūras. Beta-laktāma antibiotikas Tetraciklīni. Aminoglikozīdi. Makrolīdi un azolīdi. Ansamicīni (rifampicīni). Levomicetīns. Fluorhinolonu antibiotikas. Linkomicīns. Polimiksīni. Glikopeptīdi

Antibiotiku klasifikācija, pamatojoties uz darbības mehānismu uz baktēriju šūnu.

Mikroorganismu rezistences mehānismi pret antibakteriālām zālēm.

Metodes baktēriju jutības noteikšanai pret antibiotikām un citām ķīmijterapijas zālēm. Jutības iestatīšanas, ierakstīšanas un novērtēšanas tehnika, izmantojot diska metodi, E-tests, sērijveida atšķaidījumi.

NODARBĪBA Nr.9

TĒMA: BAKTĒRU EKOLOĢIJA. INFEKCIJA. PATOGĒNIE MIKROORGANISMI. MIKROBIĀLIE TOKSĪNI. BIOLOĢISKĀ (EKSPERIMENTĀLĀ) METODE.

PĀRBAUDES SARAKSTS

Cilvēka ķermeņa mikroflora . Normāla (rezidenta) cilvēka mikroflora. Autohtona un alohtona, parietālā un luminālā mikroflora. Normālas mikrofloras veidošanās un attīstība. Normālās mikrofloras funkcijas: pretinfekcijas, vielmaiņas, imūnbioloģiskas, antitoksiskas.

Dismikrobiocenoze (disbakterioze), cēloņi, veidi, korekcijas principi.

Infekcijas jēdziens. Definīcija, vispārīgie raksturlielumi. Atšķirības starp infekcijas slimībām un neinfekcijas slimībām.

Mikroorganisma loma infekcijas procesā. Infekciozā deva. Infekcijas metodes. Ieejas vārti. Patogenitāte un virulence. Patogenitātes un virulences ģenētiskā kontrole. Faktori, kas palielina un samazina mikrobu virulenci.

Patogenitātes faktori. Virulences noteikšanas metodes, vienības. Obligāti patogēni un nosacīti patogēni mikroorganismi.

Mikroorganismu toksicitāte un toksicitāte. Endotoksīni, īpašības, ražošana, pielietojums. Eksotoksīni, īpašības, ražošana, mērvienības. Eksotoksīnu veidi, darbības mehānisms.

Makroorganisma loma infekcijas slimību attīstībā un norisē. Iedzimtie faktori. Ķermeņa anatomiskais un fizioloģiskais stāvoklis. Dzīves apstākļu nozīme infekcijas slimību attīstībā un norisē. Dabiskie faktori. Sociālie faktori.

Infekcijas procesu klasifikācija pēc smaguma pakāpes, patogēna rakstura, infekcijas avota, patogēna pārnešanas veida un infekcijas mehānisma un izplatības. Infekcijas procesu klasifikācija pēc mikrobu fokusa lokalizācijas, kursa ilguma un infekcijas biežuma.

Infekcijas procesa dinamika, pazīmes.

Bioloģiskās (eksperimentālās) izpētes metode, posmi, izvērtēšana. Laboratorijas dzīvnieki. Infekcijas metodes.

LABORATORIJAS DARBS

1 Normālas mikrofloras pētījums.

A) Sēja, lai pētītu normālu roku ādas mikrofloru uz Endo barotnes un asins agara replikas metode.

Metodes princips: samitriniet sterilus filtrpapīra gabalus 1x1 cm Petri trauciņā ar sterilu fizioloģisko šķīdumu. risinājums. Ar sterilu pinceti uz 0,5 minūtēm uz izmeklējamās ādas virsmas uzliek papīra gabalu. Novietojiet papīru uz blīvās barotnes virsmas (drukā) uz 1 minūti. Noņemiet papīru. Inkubējiet plāksnes ar nospiedumiem 37 0 C temperatūrā 24-48 stundas.

C) Veikt mikrofloras inokulācijas uzskaiti, sagatavot preparātus no dažāda veida kolonijām, Grama krāsojumu, mikroskopu (demonstrācijas inokulācijās).

Mikrofloras inokulācijas uzskaite:

Preparātu mikroskopija:

2 Adhēzijas novērtējumsE. coliar spēju adsorbēties uz sarkano asins šūnu virsmas

Metodes princips: Mikroorganismu testa kultūru pievieno eritrocītu suspensijai. Pēc inkubācijas sagatavo uztriepes, nokrāso un mikroskopā nosaka vidējo uz vienas sarkanās asins šūnas adsorbēto baktēriju skaitu.

Šajā gadījumā sarkanās asins šūnas tiek izmantotas kā jutīga mikroorganisma paraugšūna.

3 Invazivitātes enzīmu noteikšana stafilokokos

1. Plazmokoagulāze

Metodes princips: Testa kultūru pievieno mēģenē, kurā ir citrāta truša asins plazma. Pēc inkubācijas termostatā rezultāts tiek ņemts vērā. Ja rezultāts ir pozitīvs, plazma sarecē (koagulējas).

2.Fibrinolizīns

Metodes princips: Testa kultūru pievieno mēģenē ar fibrīnu (no sarkanajām asins šūnām izskalots asins receklis). Pēc inkubācijas termostatā rezultāts tiek ņemts vērā. Ja rezultāts ir pozitīvs, trombs izšķīst.

3.Hialuronidāze

Metodes princips: Testa kultūru pievieno mēģenē ar hialuronskābi (HA). Pēc inkubācijas termostatā tiek pievienots reaģents, kas izraisa HAA koagulāciju, un rezultāts tiek ņemts vērā. Ja rezultāts ir pozitīvs (HAA sadalīšanās dēļ), trombs neveidojas.

4.Lecitovitellāze (lecitināze)

Metodes princips: izolētās stafilokoku kultūras inokulē uz dzeltenuma-sāls agara, kas satur 7,5% nātrija hlorīda un dzeltenuma suspensiju. Ja rezultāts ir pozitīvs, vistas olas dzeltenumā esošā lecitīna sadalīšanās dēļ ap virulento stafilokoku kolonijām veidojas varavīksnes halo.

Secinājums: (norādiet virulences enzīmus katram no diviem pētītajiem celmiem) _____________________________________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________________________

Baktēriju toksīni

Toksicitāte __________________________________________________________________________________________

Toksigenitāte ______________________________________________________________________________________

Endotoksīns ______________________________________________________________________________________

Endotoksiskais šoks ________________________________________________________________________________

Endotoksīnu praktiskā pielietošana:

Eksotoksīns _______________________________________________________________________________________

Anatoksīns __________________________________________________________________________________________

Shēma eksotoksīna un toksoīda iegūšanai.

1.____________________________________________________________________________________________

2.____________________________________________________________________________________________

4.____________________________________________________________________________________________

Toksoīdu praktiskā lietošana:

1.____________________________________________________________________________________________

2.____________________________________________________________________________________________

3.____________________________________________________________________________________________

Etest® ir inerta plastmasas sloksne, kas satur pretmikrobu līdzekli koncentrācijas gradientā no minimālās līdz maksimālajai diapazonā, kas līdzvērtīgs 15 divkāršiem atšķaidījumiem. Sloksnes otrā pusē ir atbilstošās minimālās inhibējošās koncentrācijas (MIC) skala. E-testi ļauj noteikt pretmikrobu līdzekļa minimālo inhibējošo koncentrāciju (kvantitatīvā difūzijas metode).
. Uzsēj plāksni ar mikroorganisma kultūru.
. Novietojiet Etest® sloksnes (līdz 2 uz standarta 90 mm diametra krūzes vai līdz 6 uz 180 mm diametra krūzes).
. Audzēšanas procesā ap sloksni veidosies elipsoidāla augšanas kavēšanas zona, kas šķērso joslu MIC atbilstošā punktā.
. E-testi tiek izmantoti vairāk nekā 20 gadus.
. Vairāk nekā 100 pretmikrobu zāļu.
. Sloksnes vairāku zāļu rezistences noteikšanai.
. Izvēlīgo mikroorganismu, streptokoku, anaerobo mikroorganismu, sēnīšu (ieskaitot pelējumu), mikobaktēriju tuberkulozes u.c. jutīguma noteikšana.
. Ērta izlaišanas forma: 30 vai 100 gabali, blisteriepakojumā vai putu kārtridžā.